试剂 半岛游戏平台官网入口网址 设备 原料
银牌会员第 5
访问量: 2318401 网址:hydranal.cnreagent.com 在线留言
半岛bd体育手机客户端 搜索
检测试剂盒 >> 生化试剂盒
淀粉分支酶(SBE)活性检测试剂盒(微量法)
淀粉分支酶(SBE)活性检测试剂盒(微量法)图片
包装: 100管/48样
索取资料及报价
半岛bd体育手机客户端 介绍

注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。

淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE可切断支链淀粉侧支,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

半岛bd体育手机客户端 内容:

提取液:液体50ml×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体10ml×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1支,4℃保存。临用前每支加入1ml双蒸水,缓慢加热,逐渐升温至沸腾,使其充分溶解,备用。

试剂三:液体13ml×1瓶,4℃保存;试剂四:液体2.5ml×1瓶,4℃保存;

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水

操作步骤:

一、粗酶液提取

称取约0.1g组织加入1ml提取液,冰浴中匀浆。15000g ,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。

二、测定步骤

1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称(μL) 对照管 测定管
煮沸1min后灭活的粗酶液 63
粗酶液
63
试剂一 80 80
试剂二 8 8
混匀,37℃准确保温20 min,置沸水浴中1 min终止反应(盖紧防止水分散失),冷却
试剂三 124 124
试剂四 25 25
混匀,室温静置10min,取200uL至微量玻璃比色皿/96孔板中,660nm处读取各管吸光值。

注:若有样品浑浊,建议离心后取上清测定。

三、SBE活力单位的计算

1、按照蛋白浓度计算单位的定义:

以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在1ml反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性(U/mg prot)=(A对照管-A测定管)/A对照管×100%÷1%÷(Cpr×V样本)×V反应=(A对照管-A测定管)/A对照管÷Cpr×476

2、按照样本鲜重计算单位的定义:

以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在1ml反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性(U/g鲜重)=(A对照管-A测定管)/A对照管×100%÷1%÷(W÷V提取×V样本)×V反应=(A对照管-A测定管)/A对照管÷W×476

V样本:加入粗酶液体积,0.063ml;V提取:加入提取液体积,1ml;Cpr:蛋白浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g;V反应,反应体系体积,0.3ml。

注意事项:

1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行1min沸水浴处理。

2、试剂一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

相关半岛bd体育手机客户端
我要咨询 关闭
  • 姓名*
  • 电话*
  • 单位*
  • email
  • 留言内容*
  • 验证码*
  • 让更多商家关注
  • Baidu
    map