土壤过氧化氢�?S-CAT)活性检测试剂盒(微量�?

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包装: 100�?48栶�/span>
索取资料及报件�/span>

产品介绍

S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类，在H₂O₂清除系统中具有重要作用、�/span>

H₂O₂�?40nm下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即可反应S-CAT活性的高低、�/span>

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测、�/span>

产品组成９�/strong>

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体0.3ml×1瓵�/span>	4ℂ�/span>
试剂事�/span>	粉剂×1�?/span>	4ℂ�/span>
试剂丈�/span>	液体3ml×1瓵�/span>	4ℂ�/span>

溶液的配制：

1.试剂一：液体置于试剂瓶内EP管中。临用前�?.1ml试剂一加入9.9ml蒸馏水稀释待用或者按比例配制。用不完的试�?℃保存；

2.试剂二：临用前加�?ml蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存、�/span>

需自备的仪器和用品９�/strong>

紫外分光光度�?酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV�?、研钵、蒸馏水�?0�?0目筛、�/span>

操作步骤９�/strong>

一、样本处�?可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文�?

新鲜土样自然风干�?7℃烘箱风干，�?0�?0目筛。二、测定步骣�/span>

1.分光光度计或酶标仪预�?0min以上，调节波长至240nm，蒸馏水调零、�/span>

2.加样表：

试剂名称	测定箠�/span>	无基质管	无土箠�/span>
风干土样(g)	0.03	0.03
试剂一(μL)	260		260
双蒸�?μL)		260
25℃振荡培� 20min
试剂�?μL)	10	10	10
混匀 8000g�?5℃离� 5min，取全部上清
试剂�?μL)	30	30	30

混匀，取 200μL至微量石英比色皿� 96孔板中，240nm处记录各管吸光� A�?每个测定管要设一个无基质管，无土管只要做 1-2�?

三�?strong>S-CAT活性计箖�/span>

A.用微量石英比色皿测定的计算公式如上�/span>
单位的定义：每天� g风干土样催化 1mmolH₂O₂降解定义为一个酶活力单位、�/span>
计算公式：S-CAT(U/g土样)=[(A无土�?A测定�?A无基质管)×V反总�?ε×d)×10³]÷W÷T=16.5×(A无土�?A测定�?A无基质管)
V反总：反应体系总体积，3×10^-4L；ε：过氧化氢摩尔消光系数�?3.6L/mol/cm；d：比色皿光径�?cm；T：反应时间，20min=1/72d；W：样本质量，0.03g、�/span>
B.� 96孔板测定的计算公式如上�/span>
单位的定义：每天� g风干土样催化 1mmolH₂O₂降解定义为一个酶活力单位、�/span>
计算公式：S-CAT(U/g土样)=[(A无土�?A测定�?A无基质管)×V反总�?ε×d)×10³]÷W÷T=27.5×(A无土�?A测定�?A无基质管)
V反总：反应体系总体积，3×10^-4L；ε：过氧化氢摩尔消光系数�?3.6L/mol/cm；d�?6孔板光径�?.6cm；T：反应时间，20min=1/72d；W：样本质量，0.03g、�/span>
注意事项:
如果吸取的上清仍有部分浑浊，可以在加入试剂三后统一再次进行离心、�/span>
相关发表文献９�/strong>
Hou Q, Wang W, Yang Y, et al. RhizospHere microbial diversity and community dynamics during potato cultivation[J]. European Journal of Soil Biology, 2020, 98: 103176.
参考文献：
[1]杨兰�?曾巧,李海�? et al.紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性[J].土壤通报, 2011, 42(1):207-210. [2] Johansson L H, Borg L A H. A spectropHotometric method for determination of catalase activity in small tissue samples[J]. Analytical biochemistry, 1988, 174(1): 331-336.