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产品介绍
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用、/span> H2O2?40nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低、/span> 注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测、/span> 产品组成9/strong>
溶液的配制: 1.试剂一:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前?.1ml试剂一加入9.9ml蒸馏水稀释待用或者按比例配制。用不完的试?℃保存; 2.试剂二:临用前加?ml蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存、/span> 需自备的仪器和用品9/strong> 紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器?ml石英比色皿、研钵、蒸馏水?0?0目筛、/span> 操作步骤9/strong> 一、样本处?可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文? 新鲜土样自然风干?7℃烘箱风干,?0?0目筛、/span> 二、测定步骣/span> 1.分光光度计预?0min以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零、/span> 2.加样表:
混匀?40nm处记录各 A值?每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做 1-2? 三?strong>S-CAT活性计箖/span> 单位的定义:每天 g风干土样催化 1mmolH2O2降解定义为一个酶活力单位、/span> 计算公式:S-CAT(U/g土样)=[(A无土?A测定?A无基质管)×V反总?ε×d)×103]÷W÷T=18.9×(A无土?A测定?A无基质管) V反总:反应体系总体积,1.145×10-3L;ε:过氧化氢摩尔消光系数?3.6L/mol/cm;d:比色皿光径?cm:/span> T:反应时间,20min=1/72d;W:样本质量,0.1g、/span> 注意事项: 如果吸取的上清仍有部分浑浊,可以在加入试剂三后统一再次进行离心、/span> 相关发表文献9/strong> [1] Hou Q, Wang W, Yang Y, et al. RhizospHere microbial diversity and community dynamics during potato cultivation[J]. European Journal of Soil Biology, 2020, 98: 103176. 参考文献: [1]杨兰?曾巧,李海? et al.紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性[J].土壤通报, 2011, 42(1):207-210. [2] Johansson L H, Borg L A H. A spectropHotometric method for determination of catalase activity in small tissue samples[J]. Analytical biochemistry, 1988, 174(1): 331-336. |
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