一、细胞基本属�?/strong>

细胞名称：小鼠胚胎成纤维细胞

细胞别称�?T3-L1; 3T3L1; 3T3L1; 3T3-L1 ad; NIH-3T3-L1; NIH3T3-L1

细胞货号：SNL-022

细胞种属：小鼟�/p>

生长情况：贴�?/p>

培养条件：H-DMEM+10%FBS+1%双抗

培养环境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、细胞培养操佛�/strong>

换液周期�?-3�?/p>

培养基体积：T25�?0-12ml�?0cm�?2-15ml

传代比例�?:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法９�/p>

1.尽量吸干净T25瓶原培养基；

2.�?-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS：�/p>

3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；

4.将培养瓶放入37度培养箱消化：�/p>

5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；

6.混匀细胞�?00rpm离心3-5min，弃上清：�/p>

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里：�/p>

8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；

注意事项：不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态、�/p>

三、细胞冻存操佛�/strong>

冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)�?2%完全培养�?8%DMSO(高手推荐);

冻存规格�?00-300�?ml�?ml每管

冻存方法９�/p>

1. 离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞：�/p>

2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；

3. 将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，**天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒�?度静�?-10min，再-20度静�?h后转�?80度过夜，**天转入液氮保字�/p>

注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方桇�/p>

Tips９�/p>

1.细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间：�/p>

2.注意控制细胞密度，过高或者过低都可能影响细胞状态，不要长时间高密度培养：�/p>

我们推荐使用尚恩生物3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）专用完全培养基（产品货号：SNLM-022）作为体外培�?T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）的培养基、�/p>