二氢黄酮醇还原酶（DER）测试盒操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接�?7℃溶�?;试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含�?如样品浓度过高时,应对样品进行稀�?以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范�?计算时再乘以相应的稀释倍数、�/p>

1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样�?00μl,注意不要有气�?加样将样品加于酶标板孔底�?尽量不触及孔�?轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆�?37℃反�?20分钟。为保证实验结果有效�?每次实验请使用新的标准品溶液、�/p>

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作� 100μl(在使用前一小时内配�?,酶标板加上覆�? 37℃反�?0分钟、�/p>

3. 温育60分钟�?弃去孔内液体,甩干,洗板3�?每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍�?、�/p>

4. 每孔加检测溶液B工作�?同检测A工作�? 100μl,酶标板加上覆�?7℃反�?0分钟、�/p>

5. 温育60分钟�?弃去孔内液体,甩干,洗板5�?每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍�?、�/p>

6. 依序每孔加底物溶�?0μl,酶标板加上覆�?7℃避光显�?30分钟�?此时肉眼可见标准品的�?-4孔有明显的梯度兰�?�?-4孔梯度不明显,即可终止)、�/p>

7. 依序每孔加终止溶�?0μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确�?底物反应时间到后应尽快加入终止液、�/p>

8. 用酶联仪�?50nm波长依序测量各孔的光密度(OD�?、�/p>