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兔淋巴细胞功能相关抗?ELISA试剂盒操作步骣/div>
2024.01.03 点击801欠/div>

兔淋巴细胞功能相关抗?ELISA试剂监/span>操作步骤

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品?0孔,在di一、第二孔中分别加标准?00μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各?00μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各?0μl弃掉,再各取50μl分别?0μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别?0μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都?0μl,浓度分别为180 ng/L?20 ng/L ?0 ng/L?0 ng/?5 ng/L)、/span>

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样?0μl(样品最终稀释度?倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀、/span>

3. 温育:用封板膜封板后?7℃温?0分钟、/span>

4. 配液:将30?8T?0倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30?8T?0倍)倍稀释后备用、/span>

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静?0秒后弃去,如此重?次,拍干、/span>

6. 加酶:每孔加入酶标试?0μl,空白孔除外、/span>

7. 温育:操作同3、/span>

8. 洗涤:操作同5、/span>

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀?7℃避光显?5分钟.

10. 终止:每孔加终止?0μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)、/span>

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液?5分钟、/span>


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