猪布氏杆菌PCR检测试剂盒反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列� 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则９�/p>

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右、�/p>

②引物扩增跨度： �?00-500bp为宜，特定条件下可扩增长�?0kb的片段、�/p>

③引物碱基：G+C含量�?0-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避�?个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列、�/p>

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别�?'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带、�/p>

⑤引�?'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败、�/p>