同源转录调节蛋白Sin3A抗体的标记实验要点：

1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存�?会抑制标记反应。因�?蛋白质在反应前要� 0.1mol/L缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析：�/p>

2.所用的NHSB及待化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的�?氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活：�/p>

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成化不�?此时可加入去污剂� Triton x-100, Tween20等；

5.当游离�?氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点�?或位于酶的催化位点时,化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.还可能与不同的功能基�?如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及�?也可与糖基共价结合；

7.交联反应�?应充分透析,否则,残余的会对化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验�?中和亲和素的本底�?但由于链霉亲和素含有少量正电�?故对某些细胞可导致高本底、�/p>