土壤无机磷(S-PHOS)含量检测质量检测:
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm?80nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度、/p>
浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。具体计算如下:
RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul?:100稀释至495的TE中,测得A260 = 0.21
RNA 浓度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 0.84 g
?ul用来测量以后,剩余样品RNA?5 l,剩余RNA总量为:
35 l × 0.84 gl = 29.4 g
②纯度检浊/p>
RNA溶液的A260/A280的比值即为RNA纯度,比值范?.8?.1、/p>
2)变性琼脂糖凝胶电泳测定
①制胵/p>
1g琼脂糖溶?2ml水中,冷却至60℃,10 ml?0× MOPS电泳缓冲液和18 ml?7% 甲醛溶液(12.3 M)、/p>
10×MOPS电泳缓冲涱/p>
浓度 成分
0.4M MOPS,pH 7.0
0.1M 乙酸钟/p>
0.01M EDTA
灌制凝胶板,预留加样孔至少可以加?5 l溶液。胶凝后取下梳子,将凝胶板放入电泳槽内,加足量的1×MOPS电泳缓冲液至覆盖胶面几个毫米、/p>