钙调节蛋ç™?1å…疫组化试剂监ü/span>æ ·æœ¬å¤„ç†åŠè¦æ±‚:
1. 血清:室温血液自然å‡å›?0-20分钟,离å¿?0分钟左å³ï¼?000-3000è½?分)。仔细收集上清,ä¿å˜è¿‡ç¨‹ä¸å¦‚å‡ºçŽ°æ²‰æ·€ï¼Œåº”å†æ¬¡ç¦»å¿ƒã€ü/span>
2. è¡€æµ†ï¼šåº”æ ¹æ®æ ‡æœ¬çš„è¦æ±‚选择EDTAæˆ–æŸ æª¬é…¸é’ ä½œä¸ºæŠ—å‡å‰‚,混å?0-20分钟åŽï¼Œç¦»å¿ƒ20分钟左å³ï¼?000-3000è½?分)。仔细收集上清,ä¿å˜è¿‡ç¨‹ä¸å¦‚有沉淀形æˆï¼Œåº”è¯¥å†æ¬¡ç¦»å¿ƒã€ü/span>
3. å°¿æ¶²ï¼šç”¨æ— èŒç®¡æ”¶é›†ï¼Œç¦»å¿ƒ20分钟左å³ï¼?000-3000è½?分)。仔细收集上清,ä¿å˜è¿‡ç¨‹ä¸å¦‚有沉淀形æˆï¼Œåº”冿¬¡ç¦»å¿ƒã€‚胸腹水ã€è„‘脊液å‚照实行ã€ü/span>
4. 细胞培养上清:检测分泌性的æˆä»½æ—¶ï¼Œç”¨æ— èŒç®¡æ”¶é›†ã€‚离å¿?0分钟左å³ï¼?000-3000è½?分)。仔细收集上清。检测细胞内的æˆä»½æ—¶ï¼Œç”¨PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到
100ä¸?mlå·¦å³ã€‚通过åå¤å†»èžï¼Œä»¥ä½¿ç»†èƒžç ´å并放出细胞内æˆä»½ã€‚离å¿?0分钟左å³ï¼?000-3000è½?分)。仔细收集上清。ä¿å˜è¿‡ç¨‹ä¸å¦‚有沉淀形æˆï¼Œåº”冿¬¡ç¦»å¿ƒã€ü/span>
5. ç»„ç»‡æ ‡æœ¬ï¼šåˆ‡å‰²æ ‡æœ¬åŽï¼Œç§°å–é‡é‡ã€‚åŠ å…¥ä¸€å®šé‡çš„PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻ä¿å˜å¤‡ç”¨ã€‚æ ‡æœ¬èžåŒ–åŽä»ç„¶ä¿æŒ2-8â„ƒçš„æ¸©åº¦ã€‚åŠ å…¥ä¸€å®šé‡çš„PBS(PH7.4ï¼‰ï¼Œç”¨æ‰‹å·¥æˆ–åŒ€æµ†å™¨å°†æ ‡æœ¬åŒ€æµ†å……åˆ†ã€‚ç¦»å¿?0分钟左å³ï¼?000-3000è½?分)。仔细收集上清。分装åŽä¸€ä»½å¾…检测,其余冷冻备用ã€ü/span>
6. æ ‡æœ¬é‡‡é›†åŽå°½æ—©è¿›è¡Œæå–,æå–按相关文献进行,æå–åŽåº”尽快进行实验。若ä¸èƒ½é©¬ä¸Šè¿›è¡Œè¯•验,å¯å°†æ ‡æœ¬æ”¾äº?20℃ä¿å˜ï¼Œä½†åº”é¿å…åå¤å†»èž.
7. ä¸èƒ½æ£€æµ‹å«NaN3çš„æ ·å“ï¼Œå› NaN3æŠ‘åˆ¶è¾£æ ¹è¿‡æ°§åŒ–ç‰©é…¶çš„ï¼ˆHRP)活性ã€ü/span>