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桔青霉探针法荧光定量PCR检测试剂盒实验禁忌
2021.05.13 点击941次

桔青霉探针法荧光定量PCR检测试剂盒探针是一种寡核苷酸探针,它的荧光与目的序列的扩增相关。它与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。荧光基团连接在探针的5’ 末端,而淬灭剂则在3’ 末端。当完整的探针与目标序列配对时,荧光基团发射的荧光因与3’ 端的淬灭剂接近而被淬灭。但在进行延伸反应时,聚合酶的5’ 外切酶活性将探针进行酶切,使得荧光基团与淬灭剂分离。随着扩增循环数的增加,释放出来的荧光基团不断积累。因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。相对于染料法,Taqman探针法具有更高的特异性和准确性。

实验禁忌:

1、浓洗涤液可能会有结晶析出,ELISA试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

2、如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数(×5×n)。

3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其正确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数目多,推荐使用排枪加样。

4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5、严格按照说明书的操纵进行,ELISA试剂盒试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

6、从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装进密封袋中保存。

7、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

8、本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

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