正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定、�/span>

磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率，进而为合理施肥提供依据、�/span>

总磷经消化后，转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法，一定条件下，钼蓝与磷酸根生�?60nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量，进而可计算出组织中总磷含量、�/span>

产品内容９�/strong>

试剂一：液�?0ml×1瓶，4℃保�?强腐蚀性，强氧化�?、�/span>

试剂二：液体11ml×1瓶，4℃保存、�/span>

试剂三：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前配制，加�?0ml蒸馏水，溶解后再加入5ml试剂二，混匀、�/span>

标准品：液体1ml×1支，1mmol/L无机磷标准液�?℃保存、�/span>

需自备的仪器和用品９�/strong>

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪�?ml玻璃比色皿、蒸馏水和浓硫酸、�/span>

操作步骤９�/strong>

一、有机磷消化９�/span>

取带盖试管，进入精确称取�?.1 g组织，加浓硫�?.0 ml，盖�?防止水分散失)后沸水浴10min左右，待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后，加试剂一200μL，充分混匀，盖紧后继续沸水浴，直到溶液呈透明状，取出室温冷却后，加蒸馏水3.8 ml，充分混匀；室温，10000rpm，离�?0min，取上清液，待测、�/span>

二、测定：

1.分光光度计预�?0min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零、�/span>

2.打开水浴锅，调节温度�?0℃、�/span>

3.测定９�/span>

试剂名称(μL)	空白箠�/span>	标准箠�/span>	测定箠�/span>
标准涱�/span>		50
上清涱�/span>			50
蒸馏氳�/span>	500	450	450
试剂丈�/span>	500	500	500

混匀后置�?0℃水浴保�?0min，室温冷�?0min后于660nm测定吸光度，分别记为A空白管、A标准管、A测定管、�/span>

三、组织总磷含量计算９�/span>

总磷含量(mmol/g FW)= [C标准液�?A测定管－A空白�?÷(A标准管－A空白�?]×V总÷W=0.005×(A测定管－A空白�?÷(A标准管－A空白�?÷W

C标准液：1mmol/L；V总：上清液总体积，5ml=0.005 L。W：样品质量，g、�/span>

注意事项９�/strong>

1、试剂三需临用前配制，限当天使用、�/span>

2、测定前先用1�?个样品做预实验，如吸光值大�?.8，需用蒸馏水做相应稀释、�/span>