土壤总磷包括有机磷和无机磷，其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷，可以全面反映土壤磷营养状况、�/p>

利用钼蓝法定磷。取一份土样，通过浸提法测定土壤无机磷含量；另外取一份土样，经高温灼烧后，土壤有机磷转化为无机磷，测得土壤总磷含量；总磷含量减去无机磷含量，即可计算出有机磷含量、�/p>

技术指标：

最低检出限�?.5249μg/ml

线性范围：2-80μg/ml

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测、�/p>

产品组成９�/strong>

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体50ml×1瓵�/td>	4ℂ�/td>
试剂事�/td>	液体11ml×1瓵�/td>	4ℂ�/td>
试剂丈�/td>	粉剂×1瓵�/td>	4ℂ�/td>
标准�?/td>	液体1ml×1�?/td>	4ℂ�/td>

溶液的配制：

1.试剂一：临用前用蒸馏水稀�?0倍后再用：�/p>

2.试剂三：临用前配制，加入20ml蒸馏水，充分溶解后加�?0ml试剂二，混匀：�/p>

3.标准品：40μg/ml无机磷标准品、�/p>

需自备的仪器和用品９�/strong>

可见分光光度计、台式离心机、可调式水浴锅，分析天平、可调式移液器�?50℃高温电炉�?ml玻璃比色皿、研钵、蒸馏水�?0-50目筛子�?00目筛子、�/p>

操作步骤９�/strong>

一、样本处�?可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文�?

1.无机磷：称取通过30-50目筛子的风干土样0.1g，转移到10ml离心管，加入10ml试剂一，震荡混匀，然后置�?5℃水�?h�?000rpm�?5℃离�?0min，取上清液一，用于无机磷含量测定、�/p>

2.总磷提取：取通过100目筛子的风干土样�?50℃灼�?h，冷却后称取�?.1g，转移到10ml离心管，加入10ml试剂一，震荡混匀，然后置�?5℃水�?h�?000rpm�?5℃，离心10min，取上清液二，用于总磷含量测定、�/p>

二、测定步骣�/p>

1.分光光度计预�?0min，调节波长到660nm，蒸馏水调零、�/p>

2.打开水浴锅，调节温度�?0℃、�/p>

3.空白管：取EP管，依次加入500μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置�?0℃水浴保�?0min，室温冷�?0min后于660nm测定吸光度，记为A空白管、�/p>

4.标准管：取EP管，依次加入50μL标准液，450μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置�?0℃水浴保�?0min，室温冷�?0min后于660nm测定吸光度，记为A标准管、�/p>

5.测定管：取EP管，依次加入50μL上清液一或者上清液二，450μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置�?0℃水浴保�?0min，室温冷�?0min后于660nm测定吸光度，记为A测定管、�/p>

三、土壤磷含量计算

1.土壤无机磷含�?μg/g土样)=[C标准液�?A测定�?A空白�?÷(A标准�?A空白�?]×V总÷W=400×(A测定�?A空白�?÷(A标准�?A空白�?÷W

C标准液：40μg/ml；W：土壤样本质量，g；V总：上清液一总体积，10ml、�/p>

2.土壤总磷含量(μg/g土样)=[C标准液�?A测定�?A空白�?÷(A标准�?A空白�?]×V总÷W=400×(A测定�?A空白�?÷(A标准�?A空白�?÷W

C标准液：40μg/ml；W：土壤样本质量，g；V总：上清液二总体积，10ml、�/p>

3.土壤有机�?μg/g土样)=土壤总磷-土壤无机磶�/p>

注意事项:

1.试剂三配制过程中，可能会产生黑色固体，其不影响结果，注意吸取时不要将黑色固体吸入、�/p>

2.如果吸光值大� 1时，样本需用蒸馏水做相应稀释、�/p>

3.空白管和标准管只需测定 1-2次、�/p>

4.需� 40min内完成比色、�/p>