意义：蔗糖不仅是重要的光合产物，也是植物体内运输的主要物质，还是碳水化合物的贮存形式之一、�/p>

蔗糖磷酸合成� (Sucrose phosphate synthase，SPS) (EC 2.4.1.14) 以果�?6-磷酸为受体，形成的蔗� 磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径、�/p>

原理：蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸与间苯二酚反应可呈现颜色变化， � 480nm 下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比、�/p>

检测方法：微量泔�/strong>

产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
提取� ES14	100mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK235-A	2.5mL×1 瓵�/p>	-20℃保存；
AK235-B	10mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK235-C	2mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK235-D	25mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK235-E	6mL×1 瓵�/p>	4℃保存；

� 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定、�/p>

自备用品９�/strong>

可见分光光度�?酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、�/p>

粗酶提取９�/strong>

按照组织质量(g)：提取液体积(mL)� 1:5�?0 的比�?建议称取� 0.1g 组织，加� 1mL 提取液ES14)，进行冰浴匀浆�?000g 4℃离� 10min，取上清，置冰上待测、�/p>

测定步骤９�/strong>

1. 分光光度计或酶标仪预� 30min 以上，调节波长至 480nm，蒸馏水调零、�/p>

2. � EP 管中依次加入下列试剂

试剂名称	测定� (ul)	对照� (ul)	标准� (ul)	空白� (ul)
上清	10	10
蒸馏氳�/p>		45	45	55
AK235-B			10
AK235-A	45
混匀�?5℃准确水�?0min
AK235-C	15	15	15	15
沸水浴中煮沸 10min 左右(盖紧，以防止水分散失)，冷即�/p>
AK235-D	210	210	210	210
AK235-E	60	60	60	60
混匀，沸水浴 30min，冷却后，取 200μL 至微量石英比色皿� 96 孔板中，480nm 下测 定各管吸光值、�/p>

注意：标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管、�/p>SPS 活力单位的计算：

(1)按照蛋白浓度计算

单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产� 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位、�/p>

SPS 活� (μg /min/mg prot) = {C 标准管×V1×(A 测定�?A 对照�?÷(A 标准�?A 空白�?}÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定�?A 对照�?÷(A 标准�?A 空白�?÷Cpr

� 蛋白定量检测建议使用本公司：BCA Protein Assay Kit (C05-02001)

(2)按照样本鲜重计算

单位定义：每 g 组织每分钟催化产� 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位、�/p>

SPS 活� (μg /min /g 鲜重) = {C 标准管×V1×(A 测定�?A 对照�?÷(A 标准�?A 空白�?}÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定�?A 对照�?÷(A 标准�?A 空白�?÷W

注： C 标准管：标准管浓度，1000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积�?.01mL；V2：加� 提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；T：反应时间：10min、�/p>