半岛bd体育手机客户端 介绍
半岛bd体育手机客户端 及特点 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是芽孢杆菌属的一种,它们对外界有害因子抵抗力强,分布广,存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处,具有繁殖快速、生命力强、耐强酸、耐强碱、抗菌消毒、耐高氧(嗜氧繁殖)、耐低氧(厌氧繁殖)等特点,枯草芽孢杆菌在生物肥发酵或发酵床制作中应用相当广泛,可用于畜牧水产饲料添加剂、用于水环境净化,是一种多功能的微生物,也可以与多种菌种混配,在农业生产中具有重要作用,还可以帮助消化,是一种消化道益生菌,因此快速检测枯草芽孢杆菌具有重要意义。本半岛bd体育手机客户端 是根据 PCR原理开发的钩端螺旋体的检测试剂盒,它具有下列特点: 1、即开即用,用户只需要提供 DNA模板。 2、引物经过精心优化,专一性强,只扩枯草芽孢杆菌,与其他病原没有交叉反应。 3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 4、 PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。 5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次,但只能用于科研。 规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。 自备试剂 样品 DNA。 使用方法 一、样品 DNA的制备 1、用自选方法纯化 N+2个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。 2、如果有 N个样品,则需要做 N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL枯草芽孢杆菌 PCR阳性对照的 10000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA放冰上待用。 二、设置 PCR反应(40μL体系) 3、对 N+2个样品,在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照,故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分:
4、按下表设置 PCR反应:
三、电泳检测 5、取 10-20 μL PCR产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有 595bp大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。 |
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