|
SUPER Green I核酸染料
产品名称
SUPER Green I nucleic acid gel stain
产品介绍
本品用DMSO溶解,因DMSO的熔点是18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解、/strong> SUPER Green I核酸染料特点 无毒性:属花箐类染料,容易生物降解,无致癌毒性、/span> 灵敏度高:至少可检?0pg DNA,高于EB染色?5?00倍、/span> 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低、/span> 操作简单:无须脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察、/span> 适用范围广:可适用于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等、/span> 使用方便:对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用、/span> 经济:价格比银染便宜、/span> SUPER Green I 使用方法简今/strong> 1、胶染法(用法同EB) (1) 制胶时加入SUPER Green I 核酸染料。冷却胶?0℃左右,?00mL胶中加入3?μL SUPER Green I 核酸染料、/span> (2) 按照常规方法进行电泳即可、/span> 注:此方法染色可以准确确定核酸片段分子量,染料用量相对较少?mL染料大约可以?00 100mL的胶、/span> 2、点染法 (1) 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳、/span> (2) 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SUPER Green I 稀?00倍,即为SUPER Green I 工作液。SUPER Green I 工作液可以置2?℃保存一个月以上、/span> (3) 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料、/span> (4) 样品染色:向分析样品中加入SUPER Green I 工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SUPER Green I 与样品中DNA充分结合。SUPER Green I 工作液加入量为总上样量?/5?/10、/span> (5) DNA Marker染色:将5μL DNA Marker?μL DNA Marker稀释液?μLSUPER Green I 工作液混匀,室温放?分钟,使SUPER Green I 与DNA充分结合、/span> (6) 上样、电泳:按常规操作、/span> 注:用点染法染色时,灵敏度最高,染料用量最少。但大片段稍有滞后现象,如果需要更准确确定分子?与Marker对比),建议使用胶染法、/span> 3、泡染法 (1) 按照常规方法进行电泳、/span> (2) 用pH 7.0?.5 的缓冲液(如:TAE,TBE TE),按?0000?的比例稀释SUPER Green I 浓缩液,混匀,制成染色溶液、/span> (3) 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染?0?0分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上,让稀释液均匀地覆盖整个胶板,并染?0分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)、/span> 注:用泡染法染色时,可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量是三种方法中最多的、/span> 4 点染+胶染法 此法结合方法1和方?,灵敏度最高,对于低浓度样本比EB检测更灵敏、/span> 几种染色方法特点比较
SUPER Green I 使用注意事项 (1) 在SUPER Green I点染法中,电泳时间不要超?小时,否则SUPER Green I会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带、/span> (2) 用点染方法染色时,条带稍有滞后现象,如果需要确定片段精确分子量(与Marker对比),建议使用胶染法(方法1)、/span> (3) 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SUPER Green I可以全部从双链核酸上去掉、/span> (4) 如果想对 SUPER Green I 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加 0.1%?.3% 的SDS、/span> (5) 在紫外照射透视下,与双 DNA 接合 SUPER Green I呈现绿色荧光。如果胶中含有单 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色、/span> (6) SUPER Green I对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器、/span> |
同品牌产品:
|