产品及特炸�/strong>

立克次氏体为革兰氏阴性菌，是一类专性寄生于真核细胞内的 G-原核生物。是介于细菌与病毒之间，而接近于细菌的一类原核生物。一般呈球状或杆状，是专性细胞内寄生物，主要寄生于节肢动物，有的会通过蚤、虱、蜱、螨传入人体、如斑疹伤寒、战壕热。本产品就是根据 PCR原理开发的检测伯氏立克次体产品，它具有下列特点：

1、即开即用，用户只需要提� DNA模板、�/span>

2、引物经过精心优化，专一性强，只扩增伯氏立克次氏�?柯克斯体)，但跟其他微生物无交叉反应、�/span>

3、提供阳性对照，便于区分假阴性样品、�/span>

4、PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳、�/span>

5、本试剂盒足够做 40μL体系� PCR 50次、�/span>

6、本产品只能用于科研、�/span>

规格及成刅�/span>

成份	编号	十孔盒包裄�/span>
PCR MagicMix 3.0	90805	1 mL(红盖)
超纯氳�/span>	100935	1 mL(亮黄�?
伯氏立克次氏�?柯克斯体)PCR引物混合涱�/td>	13-53300yw	100 μL(白盖)
伯氏立克次氏�?柯克斯体)PCR阳性对�?1×108拷贝/μL)	60908-53300pc	50 μL(黄盖)
核酸释放�?试用�?	61202	20�?1mL、绿�?
使用手册	13-53300sc	1仼�/span>

运输及保字�/strong>

低温运输�?20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染兵�/span>他试剂、�/span>

自备试剂

样品 DNA、�/span>

使用方法

一、样� DNA的制夆�/span>

1、如果有 N个样品，必须设置 N+2个提取，多出的一个是 PC(样品制备阳性对�?，一个是 NC(样品制备阴性对�?。可以用 10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为 PC。另外用水作� NC、�/span>

2、用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸纯化试剂盒兼容。本试剂盒免费赠� 20次免 DNA提取的核酸释放剂，本产品的裂解液可以直接作为 PCR模板，省略了 DNA提取步骤、�/span>

二、设� PCR反应(40 μL体系)

3、对 N+2个样品，� PCR时需要增加一� PCR阳性对照和一� PCR阴性对照，故需要设� N+4个反应。在 N+4� PCR管中分别加入下列成分９�/span>

成分	N+2个样品管	PCR阴性对照管	PCR阳性对照管
PCR MagicMix 3.0	� 20 μL	20 μL	20 μL
伯氏立克次氏�?柯克斯体)PCR引物混合涱�/span>	� 2 μL	2 μL	2 μL
N+2个样� DNA模板	� 18 μL	-	-
PCR阴性对�?超纯�?	-	18 μL	-
PCR阳性对� (伯氏立克次氏体PCR阳性对照的 10000倍稀释液)	-	-	18 μL

4、按下表设置 PCR反应９�/span>

过程	温度	时间
预变�?/span>	95ℂ�/span>	5 min
PCR反应(35个循�?	95ℂ�/span>	30 sec
PCR反应(35个循�?	54ℂ�/span>	30 sec
PCR反应(35个循�?	72ℂ�/span>	30 sec
最后延伷�/span>	72ℂ�/span>	10 min

三、电泳检浊�/span>

5、取 10-20 μL PCR产物。电泳检� PCR产物。本产品提供� PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再� loading buffer。预期的 PCR产物阳性对照必须有 366bp条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀� 10倍后重复 PCR扩增以排� PCR抑制剂的感染、�/span>