产品及特炸�/span>

粪产碱杆菌，外型为杆、短杆或球状，直径为 0.5�?.0mm ，长度为0.5�?.6mm，通常为单一菌体排列，不产生孢子，可以借着 1�?�?有时可以高达 12�?周鞭毛移动。最适宜生长温度� 20�?7℃，属嗜中温菌。本产品是根� PCR原理开发的粪产碱杆菌检测试剂盒，它具有下列特点９�/span>

1、即开即用，用户只需要提� DNA模板、�/span>

2、引物经过精心优化，专一性强，只扩粪产碱杆菌，与其他病原没有交叉反应、�/span>

3、提供阳性对照，便于区分假阴性样品、�/span>

4、PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳、�/span>

5、本试剂盒足够做 40μL体系� PCR 50次，但只能用于科研、�/span>

规格及成刅�/span>

成份	编号	十孔盒包裄�/span>
PCR MagicMix 3.0	90805	1 mL(红盖)
超纯氳�/span>	100935	1 mL(亮黄�?
粪产碱杆� PCR引物混合涱�/span>	13-20300yw	100 μL(白盖)
粪产碱杆� PCR阳性对�?/span>(1×108拷贝/μL)	60908-20300pc	50 μL(黄盖)
使用手册	13-20300sc	1仼�/span>

运输及保字�/span>

低温运输�?20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂、�/span>

自备试剂

样品 DNA、�/span>

使用方法

一、样� DNA的制夆�/span>

1、用自选方法纯� N+2个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容、�/span>

2、如果有 N个样品，则需要做 N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量�?取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL粪产碱杆� PCR阳性对照的 1000倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模� DNA放冰上待用、�/span>

二、设� PCR反应(40μL体系)

3、对 N+2个样品，� PCR时需要增加一� PCR阳性对照和一� PCR阴性对照，故需要设� N+4个反应。在 N+4� PCR管中分别加入下列成分９�/span>

成分

N+2个样品管

PCR阴性对�?/span>

PCR阳性对�?/span>

PCR Magic Mix 3.0	� 20 μL	20 μL	20 μL
粪产碱杆� PCR引物混合涱�/span>	� 2 μL	2 μL	2 μL
N+2个样� DNA模板	� 18 μL	-	-
PCR阴性对�?�?	-	18 μL	-
PCR阳性对�?粪产碱杆� PCR阳性对照的1000倍稀释液)	-	-	18 μL

4、按下表设置 PCR反应９�/span>

过程	温度	时间
预变�?/span>	95ℂ�/span>	5 min
PCR反应(35个循�?	95ℂ�/span>	30 sec
PCR反应(35个循�?	55ℂ�/span>	30 sec
PCR反应(35个循�?	72ℂ�/span>	30 sec
最后延伷�/span>	72ℂ�/span>	7 min

三、电泳检浊�/span>

5、取 10-20 μL PCR产物�?%琼脂糖凝胶电泳检� PCR产物。本产品提供� PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再� loading buffer。阳性对照必须有 684bp大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀� 10倍后重复 PCR扩增以排� PCR抑制剂的感染、�/span>