产品及特炸�/strong>

腺伴随病�?adeno associated virus,AAV)属细小病毒科，病毒颗粒直径为 20nm，无包膜�?0面体，为目前动物病毒中最简单的一类单链线� DNA病毒。人群中，AAV感染率很高，85%的人呈血清抗体阳性，但是未发� AAV引起人体疾病，甚至早年的流行病学研究报告认为，AAV感染者减少了患癌的危险性。因此快速灵敏检测腺伴随病毒具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR原理开发的试剂盒，它具有下列特点：

1、即开即用，用户只需要提供病� DNA模板、�/span>

2、引物经过精心优化，专一性强，只扩增腺伴随病毒，与其他病毒没有交叉反应、�/span>

3、提供阳性对照，便于区分假阴性样品、�/span>

4、PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳、�/span>

5、本试剂盒足够做 40μL体系� PCR 50次，但只能用于科研、�/span>

规格及成刅�/strong>

成份	编号	十孔盒包裄�/span>
PCR MagicMix 3.0	90805	1 mL(红盖)
超纯氳�/span>	100935	1 mL(亮黄�?
腺伴随病� PCR引物混合�?/span>	13-62400yw	100 μL(白盖)
腺伴随病� PCR阳性对�?1×108拷贝/μL)	13-62400pc	50 μL(黄盖)
核酸释放剁�/span>	61202	20�?1 mL，绿�?
使用手册	13-62400sc	1仼�/span>

运输及保字�/span>

低温运输�?20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂、�/span>

自备试剂

样品 DNA、�/span>

使用方法

一、样� DNA的制夆�/span>

1、用自选方法纯� N+2个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠� 20次核酸释放剂试用装、�/span>

2、如果有 N个样品，则需要做 N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量�?取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL腺伴随病� PCR阳性对照的 1万倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模� DNA放冰上待用、�/span>

二、设� PCR反应(40μL体系)

3、对 N+2个样品，� PCR时需要增加一� PCR阳性对照和一� PCR阴性对照，故需要设� N+4个反应。在 N+4� PCR管中分别加入下列成分９�/span>

成分	N+2个样品管	PCR阴性对�?/span>	PCR阳性对�?/span>
PCR MagicMix 3.0	� 20 μL	20 μL	20 μL
腺伴随病� PCR引物混合涱�/span>	� 2 μL	2 μL	2 μL
N+2个样� DNA模板	� 18 μL	-	-
PCR阴性对�?�?	-	18 μL	-
PCR阳性对�?腺伴随病� PCR阳性对照的 1万倍稀释液)	-	-	18 μL

4、按下表设置 PCR反应９�/span>

过程	温度	时间
预变�?/span>	95ℂ�/span>	5 min
PCR反应(35个循�?	95ℂ�/span>	15 sec
PCR反应(35个循�?	55ℂ�/span>	15 sec
PCR反应(35个循�?	72ℂ�/span>	60 sec
最后延伷�/span>	72ℂ�/span>	10 min

三、电泳检浊�/span>

5、取 10-20 μL PCR产物。电泳检� PCR产物。本产品提供� PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再� loading buffer。预期的 PCR产物长度� 136bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀� 10倍后重复 PCR扩增以排� PCR抑制剂的感染、�/span>