可溶性fms样酪氨酸激�?1（sFlt-1或sVEGFR-1）是一种具有抗血管生成特性的酪氨酸激酶蛋白。作为VEGF受体1（Flt-1）的非膜相关剪接变体，sFlt-1与血管生成因子VEGF（血管内皮生长因子）和PlGF（胎盘生长因子）结合，通过降低游离VEGF和PlGF的浓度减少血管生长。它在调节不同组织的血管形成方面很重要，包括肾脏、角膜和子宫。尽管sFlt-1包含一个与Flt-1相同的细胞外结构域，但它缺乏Flt-1中的跨膜和细胞间结构域。sFlt-1�?个免疫球蛋白样结构域组成，在N�?*个结构域内有一个VEGF和PIGF的结合位点。在N端第三个结构域内有一个由10个碱性氨基酸组成的抗凝血剂肝素结合位点、�/div>

试剂盒组刅�/p>

ELISA酶标板、标准品、生物素化抗体、浓缩HRP酶结合物、酶结合物稀释液、生物素化抗体稀释液、标准品&样品稀释液、浓缩洗涤液、底物溶�?TMB)、反应终止液、封板覆膛�/p>

需自备物品

1.酶标�?450nm检测波长滤光片�?70nm�?30nm校正波长滤光�? ：�/p>

2.洗板机（可调注液量，保证每孔350μl洗液而不溢出）；

3.高精度单道加液器：�/p>

4.高精度多道加液器：�/p>

5.37℃恒温箱：�/p>

6.低温离心机；

7.纯净水或蒸馏水、�/p>

操作步骤

1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条，未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内封存于2-8℃；

2.分别将标本或不同浓度的标准品加入相应孔中(100μl/�?� 37℃孵箱孵�?0分钟：�/p>

3.弃掉板内液体，洗�?次；

4.加入生物素化抗体工作�?100μl/�?�?7℃孵箱孵�?0分钟；弃掉板内液体，洗板3次；

5.除空白孔外，加入酶结合物工作�?100μl/�?�?7℃孵箱，避光孵育30分钟；弃掉板内液体，洗板5欠�/p>

6.加入TMB显色工作液（包括空白孔）100μl/孔，37℃孵箱，避光孵育，当标准曲线高浓度的颜色较深，有明显的颜色梯度的时候，即可终止。试验显色反应请勿超�?0分钟：�/p>

7.加入终止液（包括空白孔）100μl/孔，混匀后即刻测量OD�?50nm）�?10分钟�?、�/p>

8.计算标本待测因子含量、�/p>

注意事项

1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品，其他成分不可冻结、�/p>

2.浓缩生物素化抗体，浓缩酶结合物体积小，运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下�?000rpm离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底、�/p>

3.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，使结晶完全溶解后再配制洗涤液、�/p>

4.实验过程中，冻干标准品为一次性使用，不得分装。因其浓度较低，溶解两小时候后，会迅速失活、�/p>

5.操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用、�/p>

6.配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，最好使用微量振荡器（使用最低频率），如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标�?分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀、�/p>

7.实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热、�/p>

8.酶免实验中标准品和样本检测时建议作复孔、�/p>

9.将不用的微孔板放进原铝箔袋中，置2-8℃保存、�/p>

10.显色液对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下、�/p>

11.超过使用有效日期的试剂盒不能应用于实验中、�/p>

12.试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，波长应该设置为450nm�?30nm.

13.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液�?M硫酸，使用时必须注意安全、�/p>

14.各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样、�/p>

15.每次试验测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔最高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数、�/p>

16.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性、�/p>

17.以洗板机洗板时，每孔注液量不应少�?50μl, 注意检查加样头是否堵塞。手工洗板时� 用带纸屑的吸水材料应慎重� 防止外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物与显色剂发生反应、�/p>

18.用终止液终止反应后，请于10分钟内读取OD值、�/p>

19.进行复孔实验时，结果计算一定要求平均值、�/p>

20.标本溶血可能会有假阳性结果，因此溶血标本不宜进行此项检测、�/p>

21.试验时，应该将加过样品的板条放于密闭盒内，并保持湿度�?0%左右：�/p>

22.为保证恒温箱内的温度�?7℃，恒温箱的温度要经常校准。以确保实验温度保持恒定�?nbsp;

精密�?/p>

批间�?CV%<10%；批内差:CV%<8%

储存

-20�?短期4ℂ�/p>

有效朞�/p>

12个月