本产品可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取Total RNA。样品在RNAiso^TMPlus中能够充分被裂解，在加入氯仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层)，RNA分布在上清层中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到Total RNA、�br/>
产品组分

试剂盒之外所需准备试剂
� 氯仿
� 异丙醆�br/>� 75%乙醇(DEPC处理水配�?
� RNase-free�?制备方法：使用RNase-free的玻璃瓶，向超纯水中加入DEPC至终浓度0. 1%(v/v)，过夜搅拌后，高温高压灭菌�?

保存和运辒�br/>1. 可以在室温下保存，建议在2-8℃下避光保存，效果更佳、�br/>2. 可以在常温下运输、�br/>
实验操作
1. TRAzol的使用量情况如下、�/span>

2. 实验样品的研磨和匀浆、�br/>A. 贴壁培养细胞
� 倒出培养液，�?×PBS清洗一次、�br/>� �?0 cm²生长的培养细胞中加入1 ml的TRAzol，水平放置片刻，使裂解液均匀分布于细胞表面并裂解细胞，然后使用移液枪吹打细胞使其脱落(对于贴壁牢固的培养细胞可用细胞刮勺剥离细�?、�br/>� 将内含细胞的裂解液转移至离心管中，用移液枪反复吹吸直至裂解液中无明显沉淀、�br/>� 室温静置5分钟、�br/>B. 悬浮培养细胞
� 将悬浮培养细胞连同培养液一起倒入离心管中�?,000 g 4℃离�?分钟，弃上清、�br/>� 向每10⁷个细胞中加入l�? ml的TRIzol、�br/>� 用移液枪反复吹吸直至裂解液中无明显沉淀、�br/>� 室温静置5分钟、�br/>C. 动物组织、植物材料样�?br/>� 将超低温冻结的RNA提取样品称量后迅速转移至用液氮预冷的研钵中，用研杵研磨组织，其间不断加入液氮，直至研磨成粉末�?无明显的可见颗粒，如果没有研磨彻底会影响RNA的收率和质量)、�br/>� 对于普通的RNA提取样品，可以向研钵中加入适量的TRAzol，将研磨成粉末状的样品完全覆盖，然后室温静置，直至样品完全融化，再用研杵继续研磨至裂解液呈透明状、�br/> 对于特殊样品，如肝、脾、骨及软骨等，可以将研磨成粉末状的样品加入到含有适量的TRAzol的匀浆管中，把匀浆管置于冰浴中进行匀浆，直至匀浆液呈无颗粒透明状、�br/>� 将匀浆液转移至离心管中，室温静置5分钟、�br/>� 12,000 g 4℃离�?分钟、�br/>� 小心吸取上清液，移入新的离心管中(切勿吸取沉淀)、�br/>3. Total RNA的提取、�br/>� 向上述步�?的匀浆裂解液中加入氯�?TRAzol�?/5体积�?，盖紧离心管盖，用力振荡(氯仿沸点低、易挥发，振荡时应小心离心管盖突然弹开)。待充分乳化溶液呈乳白状(无分相现�?后，再室温静�?分钟、�br/>� 12,000 g 4℃离�?5分钟、�br/>� 从离心机中小心取出离心管，此时匀浆液分为三层，即：无色的上清液、中间的白色蛋白层及带有颜色的下层有机相。吸取上清液转移至另一新的离心管中(切忌吸出白色中间�?、�br/>� 向上清中加入等体积的异丙醇，上下颠倒离心管充分混匀后，�?5�?0℃下静置10分钟、�br/>� 12,000 g 4℃离�?0分钟。一般在离心后，试管底部会出现沉淀、�br/>4. RNA沉淀的清洗、�br/> 小心弃去上清，缓慢地沿离心管壁加�?5％的乙醇l ml(切勿触及沉淀)，轻轻上下颠倒洗涤离心管管壁�?2,000 g 4℃离�?分钟后小心弃去乙�?为了更好地控制RNA中的盐离子含量，应尽量除净乙醇)、�br/>5. RNA的溶解、�br/> 室温干燥沉淀2�?分钟(不可以离心或加热干燥，否则RNA将会很难溶解，有关RNA溶解可以参考Troubleshooting中的相关说明)，加入适量的RNase-free水溶解沉淀，必要时可用移液枪轻轻吹打沉淀，待RNA沉淀完全溶解后于-80℃保存、�/span>