银牌会员?span style="font-size:1.5em;color:#f21">6平/div> 访问野 3572620 网址:hydranal.cnreagent.com 在线留言
试剂盒样本处理——植物组织样本的前处琅/div>
2023.06.05 点击687欠/div>

一、匀浆介?/strong>

一般采?.05 mol/L Tris-HCl pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境、/p>

二、组织匀浆的制备

1、取组织?0.2g?.5g)最少可??0mg在冰冷的PBS中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中、/p>

2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加?倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块、/p>

3、匀浆的方式:手工匀浆,机器匀浆、/p>

①手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十?6?分钟),充分研碎,制成20%的匀浆液、/p>

②机器匀浆:用组织捣碎机10,000?5,000?分上下研磨制?0%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时?0?次,间隙30秒,连续3?次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时?,镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片、染色均可以),显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间、/p>

4、将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4,000?分左右,离心10?5分钟,取上清液进行测定、/p>

三、样本保字/strong>

植物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如不反复冻融,-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月、/p>

制备好的匀浆液建议不要冻存,最好当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部分指?℃可存放3??如SOD要存??天,MDA可存??天,总蛋白测定可??天等)

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