1、准备样品：

①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保� 1个月有效，用� ALT/GPT的检测、�/span>

②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清�?20℃保� 1个月有效，用� ALT/GPT的检测、�/span>

�?选做)样品准备完毕后可以用 BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的 ALT/GPT含量、�/span>

2、制� ALT标准曲线：取丙酮酸标� 1支，准确加入丙酮酸标准稀释液 1ml，充分混匀，即配制成丙酮酸标准(100mmol/L)�?℃保存备用。临用前，按丙酮酸标�?100mmol/L)：丙酮酸标准稀释液=1�?9的比例混合，即为丙酮酸标准工作液-丙酮酸标�?2mmol/L)，按下表制备标准曲线�?*设定平行检测管，求平均值、�/span>

混匀，向各管中加入苯肼显色液 0.2ml，混匀�?7℃孵� 20min，加� ALT显色基液2ml，混匀。室温放� 5min，以蒸馏水调零，分光光度� 505nm处读取各管吸光度。各管吸光度均减去�?”号管吸光度，所得吸光度差�?纵坐�?与对应的卡门酶活力单�?横坐�?作图、�/span>

注意：标准品用分光光度计检测参考值在 0.3�?.9之间，加� ALT显色基液后其颜色依次为黄色至棕红色，应及时检测，随着时间的延长其颜色会加深，由于检测仪器、操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动、�/span>

3、ALT加样：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中� ALT酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定、�/span>

4� ALT测定：混匀，室温放� 5min，比色杯光径 1cm，以蒸馏水调零，分光光度� 505nm处测定对照管、测定管的吸光度(即为 A对照、A测定)、�/span>