产品介绍
总蛋?Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法，其中检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比、/span> 白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色?检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚?Bromocresol purple，BCP)结合生成绿色复合物，?/span>603nm处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度，可用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比 BCG?溴甲酚绿?要好，不易受时间和温度变化的影响。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途、/span> 产品组成９/span>
自备材料９/span> 1、离心管、小试管 2、分光光度计、比色杯 操作步骤(仅供参?９/span> 1、取 0.5ml白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准(20mg)，充分溶解后配制戏/span>40mg/ml白蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液?20℃保存；特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，例如待测蛋白溶解于蔗糖，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖，一般也可以 0.9%NaCl PBS作为溶解白蛋白标准品的稀释液、/span> 2、样本处理：血清、血浆样本直接取 5μl检测，对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐氳/span>(ml)=1?比例，加 9倍体积的生理盐水 PBS，冰浴下匀浆后?500g离心 10min＋/span> 5μl上清待检、/span> 3、配 BCP试剂：按 0.1ml BCP贮存液入 100ml BCP空白试剂混合即可，混合后 4℃避光保存，1个月有效、/span> 4、白蛋白加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检?*能设置平行管、/span>
5、白蛋白测定：顺序加 BCP试剂，并立即混匀，室温放?30±3)s，空白管调零，比色杯光径 1cm，以分光光度 603nm处测定标准管、测定管的吸光度( A标准、A测定)、/span> 5?备选步?当遇到脂血混浊，可设“样本空白管”： 0.01ml待测样品加入 2ml BCP空白试剂，予以校正， BCP空白试剂调零，读取”样本空白管”的吸光度，用测定管的吸光度减去”样本空白管”的吸光度后的净吸光度，计算白蛋白浓度、/span> 计算９/span>白蛋?g/L)=A测定/A标准×白蛋白标准液浓度(g/L) 参考区间： 健康成年人：36?6g/L 注意事项９/span> 1、白蛋白标准粉末溶解于白蛋白标准配制液后，即获得白蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，不影响后续检测，该蛋白标准原?20℃长期保存、/span> 2、如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定，使用酶标仪测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加、/span> 3、本法线性范围是 10?0g/L，在 10?0g/L呈良好线性范围、/span> 4、CV可达 0.45%，回收率可达 99.3%?02%，平均回收率 100.5%、/span> 5、该法测定正常样本的批间变异系数 6.3%、/span> 6、经 Leagene测定白蛋白标准溶?40mg/ml)其吸光度减去空白吸光度差值在0.35?.5之间；如果样品浓度过低，可能导致测定管吸光度与标准管吸光度之间差异不大，其避免方法为：增加标准品??待测样品的量以提高差异性，可使标准品和(?待测样品 10μl增加 50μl之间的量。其计算公式应调整为：白蛋白(g/L)=A测定/A标准×白蛋白标准液浓度(g/L)×(10/实际加入样品微升?、/span> 有效期：6个月有效；常温运输，4℃保存，白蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存、/span> 附录９/span>参考标准曲线图，Leagene测定白蛋白标准溶?40mg/ml)其吸光度减去空白吸光度差值在 0.35?.5之间；如果样品浓度过低，可能导致测定管吸光度与标准管吸光度之间差异不大；Leagene测定白蛋白标准溶液的浓度依次 4??6?4?2?0mg/ml，测出其相应的吸光度，据此做出如下标准曲线、/span>
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