SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义、�/span>

淀粉和碘结合后�?60nm有特征光吸收，SBE可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀�?碘复合物�?60nm吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性、�/span>

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测、�/span>

产品内容９�/strong>

试剂名称	规格	保存条件
提取涱�/span>	液体25ml×1瓵�/span>	4ℂ�/span>
试剂一	液体20ml×1瓵�/span>	4ℂ�/span>
试剂事�/span>	粉剂×2�?/span>	4ℂ�/span>
试剂丈�/span>	液体25ml×1瓵�/span>	4ℂ�/span>
标准�?/span>	液体5ml×1瓵�/span>	4ℂ�/span>

溶液的配制：

试剂二：临用前加�?ml蒸馏水，缓慢加热，逐渐升温至沸腾，使其充分溶解，备用、�/span>

技术指标：最低检出限�?.0074mg/ml线性范围：0.008-0.7mg/ml

注意９�/strong>

实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测、�/span>

需自备的仪器和用品９�/strong>

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器�?ml玻璃比色皿、研�?匀浆器、冰、蒸馏水、�/span>

操作步骤９�/strong>

一、样本处理理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文�?

称取�?.1g组织加入1ml提取液，冰浴中匀浆�?5000g�?℃离�?5min，取上清，置冰上待测、�/span>

二、测定步骣�/span>

1.可见分光光度计预�?0min以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零、�/span>

2.样本测定９�/span>

试剂名称(μL)	对照箠�/span>	测定箠�/span>
煮沸1min后灭活的样本	250
样本		250
试剂一	320	320
试剂事�/span>	30	30
混匀�?7℃准确保�?0min，置沸水浴中1min终止反应(盖紧防止水分散失)，冷即�/span>
试剂丈�/span>	500	500
试剂囚�/span>	100	100

混匀，室温静�?0min，用蒸馏水调零，660nm处读取各管吸光值、�/span>

注意：若有样本浑浊，建议离心后取上清测定、�/span>

三、SBE活力单位计算

1.按照蛋白浓度计算单位的定义：

以波�?60nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白�?ml反应体系中每分钟降低1%碘蓝值为一个酶活性单位、�/span>

SBE活�?U/mg prot) =(A对照�?A测定�?÷A对照管�?00%÷1%÷(Cpr×V样本)×V反应÷T =24×(A对照�?A测定�?÷A对照管÷Cpr

2.按照样本质量计算单位的定义：

以波�?60nm的吸光度下降百分率表示，每g组织�?ml反应体系中每分钟降低1%碘蓝值为一个酶活性单位、�/span>

SBE活�?U/g质量) =(A对照�?A测定�?÷A对照管�?00%÷1%÷(W÷V提取×V样本)×V反应÷T =(A对照�?A测定�?÷A对照管÷W×24

V样本：加入样本体积，0.25ml；V提取：加入提取液体积�?ml；Cpr：蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g；V反应：反应体系体积，1.2ml；T：反应时间，20min、�/span>

注意事项９�/span>

1.可以在不同对照管中加入不同的样本，然后集中进�?min沸水浴处理、�/span>

2.试剂一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀、�/span>