注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定、�/span>

测定意义

木质素是构成植物细胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇构成的一类物质，存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁。木质素主要位于纤维素纤维之间，起抗压作用、�/span>

测定原理

木质素中的酚羟基发生乙酰化后� 280nm处有特征吸收峰，280nm的吸光值高低与木质素含量正相关、�/span>

需自备的仪器和用品�?/span>

天平�?0目筛，玻璃试管、烧杯、离心机，恒温水浴锅、封口膜、烘箱、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV�?、高氯酸、�/span>

试剂组成和配刵�/strong>

试剂一：液� 50mL×1瓶，4℃保存、�/span>

试剂二：液体 50mL×1瓶，4℃保存、�/span>

试剂三：液体 100mL×1瓶，4℃保存�?如有结冰，临用前 37℃水浴解冻后使用)

样品处理

样品 80℃烘干至恒重，粉碎，� 40目筛，称取约 2mg(记为 W)� 10mL玻璃试管�?务必用玻璃试管，不可�Ep�?

测定操作�?/span>

	空白箠�/span>	测定箠�/span>
样本(mg)		2
试剂一(μL)	500	500
高氯�?μL)	20	20
� 10mL玻璃试管中，用封口膜密封，充分混匀�?0℃水� 40min，每� 10min震荡一次，然后自然冷却
试剂�?μL)	500	500
充分混匀
上清(μL)	20	20
试剂�?μL)	980(参照注意事项�?	980(参照注意事项�?
� 200μL于微量石英比色皿/96孔板，测� 280nm处吸光� A。分别记� A空白管和 A测定管，ΔA=A测定�?A空白箠�/span>

计算公式

标准曲线：y = 0.0347x+0.0068，R2=0.9889

Lignin(mg/g干重)= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反总�?0^-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068)÷0.002×50

V反总：反应总体积：1.02mL；W：样本质量，g；T：稀释倍数

注意事项

1.试剂一有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出、�/span>

2.加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人身伤害、�/span>

3.试剂三具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱子操作、�/span>

4.取上清加试剂三步骤根据自己样品乙酰化程度，试剂三的用量可调整，保证吸光值在0.1-0.8之间即可，并在公式中参与计算、�/span>