意义：葡萄糖氧化� (Glucose oxidase, GOD, GOx) (EC 1.1.3.4) 是一种存在于昆虫、真菌和细菌中的 酶，催化 D-葡萄糖氧化为 D-葡萄糖内酯。GOD 广泛应用于食品、饮料、化工、制药等行业、�/p>

原理：葡萄糖氧化酶催化产� H2O2，过氧化物酶在有氧存在时催化 H2O2 分解产生的氧又将邻联茴香 胺氧化生成有色物质，颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系、�/p>

检测方法：分光光度泔�/strong>

产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
提取� ES20	液体 60mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK136-A	液体 40mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK136-B	液体 8mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
AK136-C	液体 2mL×1 瓵�/p>	4℃保存；
工作液的配制：用前将 AK136-B � AK136-C 转移� AK136-A 中，充分混匀，待用；剩余试剂 4℃可保存一周；

� 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定、�/p>

自备用品９�/strong>

紫外分光光度�?酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、水浴锅、天平、烘箱、玻璃管、离心机、可调式� 液枪、冰和蒸馏水、�/p>

样品准备９�/strong>

1. 组织样品的制备：

组织处理:按照组织质量(g)：提取液 ES20 体积(mL)� 1:5�?0 的比�?建议称取� 0.1g � 织， 加入 1mL 提取� ES20)，进行冰浴匀浆�?000g 4℃离� 10min，取上清，置冰上待测、�/p>

2. 血�?�?：直接检测、�/p>

测定步骤９�/strong>

1. 分光光度计预� 30min 以上，调节波长至 500nm，蒸馏水调零、�/p>

2. 工作液的配制：用前将 AK136-B � AK136-C 转移� AK136-A 中，充分混匀，待用；剩余试剂4℃可保存一周；

3. 测定前将工作液在 37�?哺乳动物)� 25�?其它物种)水浴 10min 以上、�/p>

4. � 1mL 玻璃比色皿中加入 40μL 样本� 960μL 工作液，立即混匀并计时，记录 500nm � 20s吸光� A1 � 1min 20s 后的吸光� A2。计� ΔA＝A2-A1、�/p>GOD 活力单位的计算：

1. 血�?�?GOD 活力的计箖�/p>

单位定义：每 mL 血�?�?每分钟催化产� 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位、�/p>

GOD (nmol/min/mL) = [ΔA×V 反总�?ε×d)×10⁹]÷V 样÷T = 3333×ΔA

2. 动物组织 GOD 活力的计箖�/p>

(1)按蛋白浓度计箖�/p>

单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产� 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位、�/p>

GOD (nmol/min/mg prot) = [ΔA×V 反总�?ε×d)×10⁹]÷(V 样×Cpr)÷T = 3333×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计箖�/p>

单位定义：每 g 组织每分钟催化产� 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位、�/p>

GOD (nmol/min/g 鲜重) = [ΔA×V 反总�?ε×d)×10⁹]÷(W ×V 样÷V 样�?÷T = 3333×ΔA÷W

注： V 反总：反应体系总体积，1×10^-3L；ε：氧化型邻联茴香胺摩尔消光系数�?.5×10³L / mol /cm� d：比色皿光径�?cm；V 样：加入样本体积�?.04 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反 应时间，1 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g、�/p>