Δ1-吡咯�?5-羧酸合成酶（P5CS）是植物体内脯氨酸生物合成的关键酶，同时也是植物在遭受胁迫时脯氨酸合成的限速酶；脯氨酸作为一种渗透调节物质，与植物对干旱和盐胁迫的适应性密切相关。所� P5CS 在调节脯氨酸的代谢水平上具有重要作用、�br/>
检测原琅�
Δ1-吡咯�?5-羧酸合成酶（P5CS）催化谷氨酸转化成�?谷氨酸半醛，同时� NADP+还原� NADPH，通过检� NADPH � 340nm 处的增加速率，即可得� P5CS 酶活性大小、�br/>
试剂盒组成和配制９�br/>提取涱� 液体 30mL×1� ,4°C保存
试剂一: 粉体1� ,4°C保存, 临用前甩几下，使粉体落到底部，再加入 1.1mL 蒸馏水溶解备用、�br/>试剂事� 粉体 2�? -20°C保存,临用前甩几下，使粉体落到底部，每支分别加� 0.6mL 蒸馏水溶解备用，用不完的试剂分装�?20°C保存，禁止反复冻融，三天内用完、�br/>试剂丈� 液体 26mL×1 �? 4°C保存
试剂� :粉体 1� ,4°C保存, 临用前甩几下，使粉体落到底部，再加入 1.1mL 蒸馏水溶解备用、�br/>
所需的仪器和用品９�br/> 紫外分光光度计�?mL 石英比色皿（光径 1cm）、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水、�br/>
Δ1-吡咯�?5-羧酸合成酶（P5CS）活性测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪�?
1� 样本制备９�br/>� 组织样本９�br/>取约 0.1g 组织，加� 1mL 提取液，冰浴匀浆，12000rpm�?°C离心 10min，取上清液待用、�br/>【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体�?mL)� 1�?~10 的比例进行提叕�br/>� 细菌/细胞样本９�br/>先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取� 500 万细菌或细胞加入 1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超� 3s，间� 10s，重� 30 次）�?2000rpm 4°C离心 10min，取上清，置冰上待测、�br/>【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量�?04）：提取液（mL）为 500~1000�? 的比例进行提取、�br/>� 液体样本：澄清的液体样本直接检测，若浑浊则离心后取上清检测、�br/>2� 上机检测：
1 紫外分光光度计预� 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零、�br/>2 所有试剂解冻至室温�?5°C）、�br/>3 � 1mL 石英比色皿中依次加入９�br/>

混匀，室温（25°C）下�?0s 时立即于 340nm 处分别读取吸� � A1�?0min 名�br/>读取 A2，△A=（A1-A2）测�?（A1-A2）对�?nbsp; , （每个样本需做一个自身对照）、�br/>
【注【�br/> 1.若ΔA 的值在零附近徘徊，则可延长反应时间 T（如增至 30min 或更长），或加大
样本� V1（如增至 180μL，则试剂三相应减少），则改变后的反应（孵育）时间 T 或加
样体 � V1 需代入计算公式重新计算、�br/> 2.若起始� A1 太大如超� 2（如颜色较深的植物叶片，一般色素较高，则起始值相寸�br/>会偏高），可以适当减少样本加样量（则试剂三相应增加），则改变后的加样体积需仢�br/>入计算公式重新计算�?nbsp;

计算公式: