| 细胞基本属?/strong> |
| 细胞名称 |
H22-LUC-PURO(小鼠肝癌细胞-荧光素酶标记) |
| 细胞别称 |
H22-luc；小鼠肝癌细?荧光素酶标记 |
| 种属来源 |
小鼠 |
| 组织来源 |
肝脏 |
| 生长特?/span> |
悬浮生长 |
| 细胞形?/span> |
淋巴母细胞样 |
| puro药筛浓度 |
H22-LUC细胞puro药筛浓度?.0ug/ml，培养过程中可不用再添加puro，如若担心抗性随着传代时间降低，可定期?.5ug/ml浓度puro维持。加药需在细胞状态良好情况下 |
| 细胞代数 |
10代以冄/span> |
| 细胞规格 |
1×106cells/T25培养瓶或?mL冻存管包裄/span> |
| 支原体检浊/span> |
旟/span> |
| 培养培/span> |
90%RPMI-1640+10%FBS+ps |
| 培养条件 |
气相?5%空气+5%二氧化碳；温度：37ℂ/span> |
| 冻存条件 |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 特别提醒 |
H22-LUC细胞对营养要求高，需保证细胞营养充足，营养不足细胞培养液颜色变黄细胞容易死亡。建议每天换液。收到细胞时，培养瓶消毒后放培养箱稳?-4h后再拿出来拍照留档和处理、/strong> |
| 细胞货期 |
现货?周左史/span> |
| 运输方式 |
复苏发货(T25瓶免运输费用)/冻存发货(需加干冰运输费? 顺丰快逑/span> |
| 供应限制 |
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的医疗产品使?/span> |
| 特别说明 |
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
| 细胞培养操作 |
| 收货方式 |
T25瓵/strong> |
冻存箠/strong> |
| 收货处理 |
观察好细胞状态后?5%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置?7度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状?/span> |
收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苎/span> |
| 传代密度 |
细胞密度?0%-90%，即可进行传代培兺/span> |
?天换液并检查细胞密?/span> |
| 传代比例 |
初次传代建议1?传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或??cm皿。不?个T25瓶传2?0cm皾/strong> |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓵/span> |
| 传代方法 |
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离?-5min分钟，弃去上清液，补?-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液?:2?:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中、/span> 方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2?:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中、/span> |
将含? mL细胞悬液的冻存管 37℃水浴中迅速摇晃解冻，? mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离? min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜)。第2天换液并检查细胞密度、/span> |
| 注意事项 |
1.运输用的培养?灌液培养?不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞、/strong> 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象、/span> |
1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存；
2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞、/strong> |
| 到货须知 |
1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍?当天以及 2,3 天请拍照)，记录细胞状 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态、/span> 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决
4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担、/strong> |
| 备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话、/span> |
| 细胞冻存操作 |
| 冻存液配斸/span> |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 细胞密度 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下 T25 瓶为侊/span> |
| 冻存方法 |
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中?000 rpm条件下离? min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数、br/>b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106?x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识、br/>c、将冻存管放?80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取、/span> |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方桇/span> |
