| 细胞基本属?/strong> |
| 细胞名称 |
DT40鸡淋巴瘤细胞 |
| 细胞别称 |
DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40；鸡淋巴瘤细胝/span> |
| 种属来源 |
鸡；1日龄 |
| 组织来源 |
法氏囊，淋巴瘣/span> |
| 生长特?/span> |
悬浮生长 |
| 细胞形?/span> |
淋巴母细胞样 |
| 细胞代数 |
10代以冄/span> |
| 背景介绍 |
DT40是来自Hyline SC鸡法氏囊淋巴细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的。原始淋巴瘤用罗氏相关病?(RAV-1)感染出生１天的小鸡得到。法氏囊中生成的肿瘤制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后，建立了DT40细胞株 这株细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表达的c-myc RNA水平较高。它缺少一个正常c-myc基因，但含有两个拷贝ALV去调控的myc基因。这株细胞保留了重排免疫球蛋白轻链基?IgL)的能力、/span> 在IgL位点，DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40细胞株中都能诱导组织相容?MHC)II类抗原表达。v-rel 诱导的MHCII表达比c-rel诱导快，且其有效性在数周后达到c-rel?0倍。这株细胞呈淋巴母细胞表型。传染性检测表明DT40释放低水平的传染性RAV-1。这株细胞可以用于稳转研究、/span> |
| 生物安全等级 |
1 |
| 细胞规格 |
1x106cells/T25?mL冻存箠/span> |
| 支原体检浊/span> |
旟/span> |
| 保藏机构 |
ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636 |
| 培养培/span> |
90%DMEM+10% FBS |
| 培养条件 |
气相?5%空气+5%二氧化碳；温度：37ℂ/span> |
| 冻存条件 |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 倍增时间 |
?8 hours |
| 细胞货期 |
2周左史/span> |
| 运输方式 |
复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费? 顺丰快逑/span> |
| 供应限制 |
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的医疗产品使?/span> |
| 特别说明 |
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
| 细胞培养操作 |
| 收货方式 |
T25瓵/strong> |
冻存箠/strong> |
| 收货处理 |
观察好细胞状态后?5%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置?7度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状?/span> |
收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苎/span> |
| 传代密度 |
细胞密度?0%-90%，即可进行传代培兺/span> |
?天换液并检查细胞密?/span> |
| 传代比例 |
初次传代建议1?传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或??cm皿。不?个T25瓶传2?0cm皾/strong> |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓵/span> |
| 传代方法 |
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次
b、加1 mL消化?0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消? min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化
c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补?-2 mL培养液后吹匀
d、将细胞悬液?:2比例分到新的? mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养、/span> |
将含? mL细胞悬液的冻存管?7℃水浴中迅速摇晃解冻，? mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离? min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜)。第2天换液并检查细胞密度、/span> |
| 注意事项 |
1.运输用的培养?灌液培养?不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞、/strong> 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象、/span> |
1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存；
2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞、/strong> |
| 到货须知 |
1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍?当天以及 2,3 天请拍照)，记录细胞状 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态、/span> 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决、br/>4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担、/strong> |
| 备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话、/span> |
| 细胞冻存操作 |
| 冻存液配斸/span> |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 细胞密度 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下 T25 瓶为侊/span> |
| 冻存方法 |
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中?000 rpm条件下离? min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数、br/>b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106?x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识
c、将冻存管放?80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取、/span> |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方桇/span> |
