| 细胞基本属?/strong> |
| 细胞名称 |
人胆囊上皮细?永生? |
| 组织来源 |
胆囊组织 |
| 生长特?/span> |
贴壁生长 |
| 细胞形?/span> |
上皮样，多角形细胝/span> |
| 背景简今/span> |
胆囊，是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造，有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成、/span> 胆囊内面以粘膜覆盖，有发达的皱襞。胆囊收缩排空时，皱襞高大而分支；胆囊充盈时，皱襞减少变矮。粘膜上皮为单层柱状，内分散分部着少量杯状细胞。胆囊粘膜细胞具有典型的吸收型细胞的特征，具有较强的吸收和浓缩功能，上皮细胞吸收胆汁中的水和无机盐，经细胞侧面的质膜转运至上皮细胞间隙内，吸收的水和无机盐通过基膜进入固有层的血管和淋巴管内。同时，胆囊粘膜亦有分泌功能，分泌粘液、/span> 该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因、/span> |
| 细胞代数 |
10代以冄/span> |
| 细胞规格 |
1×106cells/T25培养瓶或?mL冻存管包裄/span> |
| 支原体检浊/span> |
不含 HIV-1 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
| 培养培/span> |
人胆囊上皮细胞完全培养基 |
| 培养条件 |
气相?5%空气+5%二氧化碳；温度：37ℂ/span> |
| 冻存条件 |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 细胞纯度 |
经鉴定细胞纯度高?0 |
| 细胞鉴定 |
S100免疫荧光染色为阳?/span> |
| 细胞货期 |
2周左史/span> |
| 运输方式 |
复苏发货(T25瓶免运输费用)/冻存发货(需加干冰运输费? 顺丰快逑/span> |
| 供应限制 |
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的医疗产品使?/span> |
| 特别说明 |
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
| 细胞培养操作 |
| 收货方式 |
T25瓵/strong> |
冻存箠/strong> |
| 收货处理 |
观察好细胞状态后?5%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置?7度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状?/span> |
收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苎/span> |
| 传代密度 |
细胞密度?0%-90%，即可进行传代培兺/span> |
?天换液并检查细胞密?/span> |
| 传代比例 |
初次传代建议1?传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或??cm皿。不?个T25瓶传2?0cm皾/strong> |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓵/span> |
| 传代方法 |
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次、br/>b、加1 mL消化?0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消?-2 min(视细胞情况而定)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补?-2 mL培养液后吹匀、br/>c、将细胞悬液?:2比例分到新的? mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养、/span> |
将含? mL细胞悬液的冻存管?7℃水浴中迅速摇晃解冻，? mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离? min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度、/span> |
| 细胞冻存操作 |
| 冻存液配斸/span> |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 细胞密度 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下 T25 瓶为侊/span> |
| 冻存方法 |
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中?000 rpm条件下离? min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数、br/>b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106?x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识
c、将冻存管放?80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取、/span> |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方桇/span> |
