| 细胞基本属?/strong> |
| 细胞名称 |
kyse30人食道癌细胞(STR鉴定正确) |
| 细胞别称 |
KYSE 30; KYSE30; KYSE0030；人食管鳞癌细胞 |
| 种属来源 |
亹/span> |
| 年龄性别 |
女性，64?/span> |
| 组织来源 |
食管鳞状上皮 |
| 生长特?/span> |
贴壁生长 |
| 细胞形?/span> |
上皮细胞栶/span> |
| 背景简今/span> |
Derived from well differentiated invasive esophageal squamous cell carcinoma resected from middle intra-thoracic esophagus of a 64-year-old Japanese man prior to treatment; cell line Established from tumor cells heterotransplanted into athymic mice; described in the literature to be heterotransplantable in athymic mice and to carry p53 mutation and amplification of cERB B, MYC and CYCLIN D1 |
| STR鉴定图片 |
|
| 细胞代数 |
10代以冄/span> |
| 生物安全等级 |
1 |
| 细胞规格 |
1×106cells/T25培养瓶或?mL冻存管包裄/span> |
| 支原体检浊/span> |
旟/span> |
| 保藏机构 |
DSMZ; ACC-351 ECACC; 94072011 JCRB; JCRB0188 |
| 培养培/span> |
48%RPMI-1640+48%F12+2% FBS+1%PS+1%GlutaMAX-1谷氨酰胺 |
| 培养条件 |
气相?5%空气+5%二氧化碳；温度：37ℂ/span> |
| 冻存条件 |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 倍增时间 |
?0-30小时 |
| 细胞货期 |
现货?周左史/span> |
| 运输方式 |
复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费? 顺丰快逑/span> |
| 供应限制 |
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的医疗产品使?/span> |
| 特别说明 |
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
| 细胞培养操作 |
| 收货方式 |
T25瓵/strong> |
冻存箠/strong> |
| 收货处理 |
观察好细胞状态后?5%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置?7度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状?/span> |
收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苎/span> |
| 传代密度 |
细胞密度?0%-90%，即可进行传代培兺/span> |
?天换液并检查细胞密?/span> |
| 传代比例 |
初次传代建议1?传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或??cm皿。不?个T25瓶传2?0cm皾/strong> |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓵/span> |
| 传代方法 |
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次
b、加1 mL消化?0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消?-2 min(视细胞情况而定)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补?-2 mL培养液后吹匀
c、将细胞悬液?:2比例分到新的? mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养、/span> |
将含? mL细胞悬液的冻存管?7℃水浴中迅速摇晃解冻，? mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离? min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜)。第2天换液并检查细胞密度、/span> |
| 注意事项 |
1.运输用的培养?灌液培养?不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞、br/>2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象、/span> |
1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存；
2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞、/strong> |
| 到货须知 |
1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍?当天以及 2,3 天请拍照)，记录细胞状 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态、br/>3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决
4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担、/strong> |
| 备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话、/span> |
| 细胞冻存操作 |
| 冻存液配斸/span> |
无血清冻存液，液氮储字/span> |
| 细胞密度 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下 T25 瓶为侊/span> |
| 冻存方法 |
a、收集细胞，装入无菌离心管中?000 rpm条件下离? min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106?x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识
c、将冻存管放?80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取、/span> |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方桇/span> |
