人内皮脂肪酶(EL)检测ELISA试剂监/span>操作步骤
1 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差、/span>
2 加入稀释好后的标准?0ul于反应孔、加入待测样?0ul于反应孔内。立即加?0ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀?7℃温?小时、/span>
3 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振?0秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次、/span>
4 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1?稀释后加入50ul于反应孔内、/p>
5 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀?7℃温?0分钟、/span>
6 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振?0秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次、/span>
7 每孔加入底物A、B?0ul,轻轻振荡混匀?7℃温?0分钟。避免光照、/span>
8 取出酶标板,迅速加?0ul终止液,加入终止液后应立即测定结果、/span>
9 ?50nm波长处测定各孔的OD值、/span>