大鼠外周血树突状细?DC细胞)冻存的细胞该如何开始培兺/span>
(1) 将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛、/span>
(2) 将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化、/span>
(3) 将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境、/span>
(4) ?0%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。以便保持抑制胰蛋白酶的活性用新的培养基重新悬浮细胝/span>
(5) 打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现?、/span>
(6) 用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞、/span>
(7) 盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子、/span>
(8) 将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2?5%空气)
(9) 放入培养箱后?-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞、/span>
大鼠外周血树突状细?DC细胞)完全培养 高校合作商细胞培养过程中,多久更换一次培养基?
这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。培养基可以正常使用
注意:冻存细胞复苏后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。 用吸管吹打形成细胞悬液后,分别接种到另外两到三个培养瓶中,置37℃培养箱中培养、/span>