抗人BCS1-like小鼠杂交瘤细胞；1C3C12A2培养操作规程９�/strong>

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）培养准备RPMI-1640培养�?RPMI-1640：GIBCO，货�?1875-091)�?0%；优质胎牛血清，10%、�/p>

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%� 温度�?7℃，培养箱湿度为70%-80%、�/p>

3）冻存液�?0%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存、�/p>

二．细胞处理９�/p>

1）复苏细胞：将含�?mL细胞悬液的冻存管迅速放�?7℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含�?mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离�?分钟，弃去上清液，加�?mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含�?ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度、�/p>

2）细胞传代：如果细胞密度�?0%-90%，即可进行传代培养、�/p>

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补�?-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液�?�?�?�?的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中、�/p>