小鼠3-硝基酪氨?3-NT)elisa酶联免疫试剂监/strong>操作步骤9/strong>
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相?、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加?0μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样?0μl(样品最终稀释度?倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀、/p>
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温?0分钟、/p>
3、配液:?0倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重?次,拍干、/p>
5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外、/p>
6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀?7℃避光显?0 分钟.
7、终止:每孔加终止液50μl,终止反?此时蓝色立转黄色)、/p>
8、测定:以空白空调零?50nm波长依序测量各孔的吸光度(OD?。测定应在加终止液后15分钟以内进行、/p>