鸭生长激?(GH1)ELISA试剂盒的间接法:
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1?0μg/ml,每孔加0.1ml?℃过夜、/p>
2.次日洗涤3次、/p>
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔??7℃孵?小时,洗涤?同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗?0.1ml?7℃孵?0-60分钟,洗?最后一遍用DDW洗涤、/p>
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml?7?0?0分钟、/p>
5. 终止反应:于各反应孔中加?M硫酸0.05ml、/p>
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以?”、?”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,?50nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性、/p>