猴免疫缺陷病毒RT-PCR试剂监�/span>准备试剂与收集血栶�/strong>９�/p>

双重核酸试剂盒（荧光PCR法）　1. 收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 � 保存48 小时；更长时间须冷冻� -20 ℃或 -70 � ）保存，避免反复冻融、�/p>

2. 标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏� 混匀，配� 120 0ng/ml 的溶� � 设标� � 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸� 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第� � 中吸� 500ul 弃去。第� � 为空白对照、�/p>

3. 10× 标本稀释液用蒸馏水� 1: 1 0 倍稀释（ 示例� 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）、�/p>

4. 洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例�?ml 浓缩洗涤液加� 19ml 的重蒸水（�/p>

检测程序：

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 � 120 分钟、�/p>

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗� 4-6 次，向滤纸上印干、�/p>

3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 � 6 0 分钟、�/p>

4. 洗板：同前、�/p>

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 � 3 0 分钟、�/p>

6. 洗板：同前、�/p>

7. 每孔加入底物工作�?00ul ，置 37 � 暗处反应15 分钟、�/p>

8. 每孔加入100ul 终止液混匀、�/p>

9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值、�/p>

性能９�/p>

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900、�/p>

2. 灵敏度：检测浓度小�?.1 U/mL、�/p>

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应、�/p>

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%、�/p>

5. 贮藏�?-8℃，避光防潮保存、�/p>

6. 有效期：6个月