大鼠1-磷酸鞘氨?S1P)试剂盒样本处理及要求9/p>
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放?小时?℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置?20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融、/p>
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融、/p>
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血?匀浆中裂解的红细胞会影响测量结?,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比?g的组织样品对?mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制?加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液?000×g离心5?0分钟,取上清检测、/p>
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融、/p>
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测、/p>
[需要而未提供的试剂和器材]
1.酶标?450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL?-20uL?0-200uL?00-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水