人白血病耐药细胞株安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下zui好是?X物镜)观察整个细胞生长情况。具体步骤如下:
(一)如果细胞未长满,?5%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液, 10ml新鲜培养液后继续培养、/p>
(?如果细胞已长满,即可进行传代培养、/p>
1. 弃去培养液,用PBS(不含?镁离??-2次、/p>
2. ?ml消化?0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放?7℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化、/p>
3. ?-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二、/p>
注意事项9/p>
1、观察细胞在低倍镜(4?X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请?0X?0X物镜下、/p>
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存?培养基中可不加任何抗生素、/p>
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内、/p>
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们、/p>