人结合珠蛋白/触珠蛋白ELISA检测试剂盒操作流程９�/p>

�?）待测样品孔中每孔加入待测样�?00μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解�?00μl、�/p>

�?）酶标板�?℃，包被过夜、�/p>

�?）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗�?-4次、�/p>

�?）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作�?0μl、�/p>

�?）酶标板�?7℃培养箱的湿盒内，孵�?0min、�/p>

�?）洗板，同（4）、�/p>

�?）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl、�/p>

�?）酶标板�?7℃培养箱的湿盒内，孵�?0min、�/p>

�?）洗板，同（4）、�/p>

�?0）每孔加TMB显色� 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反�?5-20min、�/p>

�?1）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应、�/p>

�?2）分别测450nm 吸光值W1�?30nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰、�/p>

�?3）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N�?.1为阳性判定标准、�/p>