ELISA样本准备及要求：

1. 血清：室温血液自然凝�?0-20分钟，离�?0分钟左右�?000-3000�?分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心、�/p>

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混�?0-20分钟后，离心20分钟左右�?000-3000�?分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心、�/p>

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右�?000-3000�?分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行、�/p>

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离�?0分钟左右�?000-3000�?分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100�?ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离�?0分钟左右�?000-3000�?分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心、�/p>

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离�?0分钟左右�?000-3000�?分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用、�/p>

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放�?20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性、�/p>

操作注意事项９�/p>

� 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存、�/p>

� 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质、�/p>

� 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用、�/p>

� 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器、�/p>

� 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品、�/p>

� 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值、�/p>

� 加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样、�/p>

� 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作、�/p>