试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度、�/p>

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后�?000转离�?0分钟将血清和红细胞迅速小心地分离、�/p>

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝�?000转离�?0分钟取上清、�/p>

3. 细胞上清液：3000转离�?0分钟去除颗粒和聚合物、�/p>

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎�?000转离�?0分钟取上清、�/p>

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存�?20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻、�/p>

自备物品

1.酶标仪（450nm（�/p>

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL�?-20uL�?0-200uL�?00-1000uL

3.37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平�?0分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用、�/p>

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存、�/p>

3. 浓度�?的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀�?倍，最终结果乘�?才是样本实际浓度、�/p>

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作、�/p>

5. 所有液体组分使用前充分摇匀、�/p>

试剂盒组戏�/p>

名称 96孔配� 48孔配� 备注

微孔酶标� 12孔�?� 12孔�?� 旟�/p>

样本稀释液 6mL 3mL 旟�/p>

检测抗�?HRP 10mL 5mL 旟�/p>

20×洗涤缓冲� 25mL 15mL 按说明书进行稀釉�/p>

底物A 6mL 3mL 旟�/p>

底物B 6mL 3mL 旟�/p>

终止� 6mL 3mL 旟�/p>

封板� 2� 2� 旟�/p>

说明� 1� 1� 旟�/p>

自封� 1� 1� 旟�/p>

注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明�?/p>

试剂的准夆�/p>

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1�?0稀释，�?份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水、�/p>

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次、�/p>

2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸�?min，洗�?次、�/p>