非洲猪瘟(ASFV)核酸诔�strong style="white-space: normal;">剁�/span>监�/span>实验注意事项９�/span>

1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况：�/span>

2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；

3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品、�/span>

4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中、�/span>

实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析、�/span>

主要服务９�/span>DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型、�/span>

主要技术：引物设计�?/span>RNA提取、cDNA合成、qPCR、�/span>

PCR反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物９�/span>引物�?/span>PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增、�/span>

产品名称９�/span>非洲猪瘟(ASFV)核酸诔�strong style="white-space: normal;">剁�/span>监�/span>

英文名称：详见说明书

编号９�/span>GOY-M1644

分类９�/span>PCR检测试剂盒

储存条件９�/span>-20℃避光保存，避免反复冻融、�/span>

运输：低温、避光、�/span>

准备物品９�/span>

清理液（A�?nbsp; 毫升

染色液（t B�?nbsp; 微升

稀释液＇�/span>C�?nbsp; 毫升

溶解液（tD�?nbsp; 毫升

产品说明�?/span> 1仼�/span>

它具有下列特点：

1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可、�/span>

2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物，能专一性检测出样品中的大豆成分，但不能检测其他非大豆成分、�/span>

3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时、�/span>

4. 只需要普� PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备、�/span>

5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%，对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL、�/span>

6. 本只能用于科研，足够 50 � 40uL 体系的常� PCR、�/span>

XPB/ERCC3 DNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体萘普甞�/span>

phospho-CAMK2G (Ter286) 磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2G抗体泼尼杽�/span>

CAP1/PARK7 CAP1抗体青蒿琥酯

CAP2 环化酶相关蛋白CAP-2抗体氢溴酸右美沙�?/span>

CAPZA1 F肌动蛋白α1亚基抗体舒必�?/span>

CAPZA2/CapZ alpha 2 F肌动蛋白α2亚基抗体沙丁胺醇

CTn1/Troponin I/TNNC1 心肌肌钙蛋白抗体双香豆素

CT-1/CTF1 心肌营养�?抗体双氰胹�/span>

CA I/Carbonic anhydrase 1 碳酸酐酶1抗体水杨酸镁

CTNNAL1 粘附分子相关蛋白a1抗体司坦唑醇
非洲猪瘟(ASFV)核酸诔�strong style="white-space: normal;">剁�/span>监�/span>钙荧光探钇�/span>Fluo4, AM 5mg

LeptinCKIP1(casein kinase 2 interaction protein 1)CD339

Metronidazole/BSACLCA4(Calciumactivated chloride channel 4)连接粘附分子1

Morphine/KLHCMer/MERTK (protooncogene tyrosine kinase)活化蛋白激酶D

reMOG 1125cMyc tag Jun激活区域连接蛋�?

MDM2AU5 tag磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK2

Metronidazole/OVAAU1 tag peptide蛋白酪氨酸激酶JAK3

Melamine/KLHGluGlu Tag peptide磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK3

Melamine/BSACNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2)磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK3
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右、�/span>

②引物扩增跨度： �?00-500bp为宜，特定条件下可扩增长�?0kb的片段、�/span>

③引物碱基：G+C含量�?0-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列、�/span>

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别�?’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带、�/span>

⑤引�?’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败、�/span>

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处、�/span>

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性、�/span>