物种

Homo sapiens (Human，人)

实验方法

双抗夹心

反应时长

3h

检测范図�/strong>

15.62-1000pg/mL

灵敏�?/strong>

最小可检测剂量小于等�?.0pg/mL.

样本类型

血�? 血�? 组织匀浆和其他生物标本.

特异�?/strong>

本试剂盒用于检测层粘连蛋白α3(LAMa3)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应、�br/>由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应、�/p>

回收玆�/strong>

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的层粘连蛋白α3(LAMa3)（加标样品），重复测定并计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率、�/p>

样本	回收率范�?%)	平均回收�?%)
serum(n=5)	78-101	90
EDTA plasma(n=5)	85-96	91
heparin plasma(n=5)	99-105	102

精密�?/strong>

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检�?每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值、�br/>批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测�?次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值、�br/>批内差： CV<10%
批间差： CV<12%

线�?/strong>

在定值血清及血浆样本内加入适量的层粘连蛋白α3(LAMa3)，并倍比稀释成1:2�?:4�?:8�?:16的待测样本，线性范围即为稀释后样本中层粘连蛋白α3(LAMa3)含量的测定值与理论值的比率、�/p>

样本	1:2	1:4	1:8	1:16
serum(n=5)	83-99%	79-90%	95-104%	85-95%
EDTA plasma(n=5)	78-88%	98-105%	93-105%	95-104%
heparin plasma(n=5)	78-90%	98-105%	93-104%	92-105%

稳定�?/strong>

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%、�br/>为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差、�/p>

实验流程

1、实验前标准品、试剂及样本的准备；
2、加样（标准品及样本�?00μL�?7℃孵�?小时：�br/>3、吸弃，加检测溶液A100μL�?7℃孵�?小时：�br/>4、洗�?次；
5、加检测溶液B100μL�?7℃孵�?0分钟：�br/>6、洗�?次；
7、加TMB底物90μL�?7℃孵�?0-20分钟：�br/>8、加终止�?0μL，立�?50nm读数、�br/>

实验原理

将层粘连蛋白α3(LAMa3)抗体包被�?6孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的层粘连蛋白α3(LAMa3)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的层粘连蛋白�?(LAMa3)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的层粘连蛋白α3(LAMa3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.�?，计算样品浓度、�/p>