产品组分
注:本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品,PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装、br/>保存条件-20℃保?年、br/>请勿保存?70℃,防止反复冻融导致酶活降低、br/>产品说明Plus Mix?×浓缩的PCR扩增预混和溶液,含有Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除?。使用时,仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污?加样次数减少)。同时,由于体系内含有优化剂与增强剂,能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有两种末端:平末端与3'-dA、br/> Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍,扩增片段的长度可?0 kb(简单模?。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序?时,Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶,可用于复杂模板的PCR扩增、br/>产品特点使用方便:仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增、br/> 快速、高效:减少加样步骤,节约时间、br/> 可重复:降低污染和加样错误风险、br/>产品用逓br/>杂模板PCR扩增高通量复杂模板PCR扩增高重复性复杂模板PCR扩增制备TA克隆用PCR产物活性定么br/>一个活性单?U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃?0 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量、br/>质量控制相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,扩增活性无明显改变、br/>2×Plus Mix的组刅br/>100 mM KCl20 mM Tris-Cl3 mM MgCl2400 mM dNTP混合?br/> 0.1 U/μl PlusTaq DNA聚合酵br/> 溴酚蓝等应用举例注:以下反应举例?0 μl标准PCR体系,仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件、br/>以λDNA为模板,扩增1kb片段、br/>
反应条件
备注1、建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果、br/> 2、Plus Mix的扩增产物有两种末端:平末端?'-dA突出末端。要提高克隆效率,建议PCR产物纯化后,加A再进行TA克隆、br/> 3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)