基本信息

产品描述

BX-795是一种有效的，特异性的PDK1抑制剂，在无细胞试验中IC50为6 nM，作用于PDK1比作用于PKA和PKC选择性分别高140和1600倍。同时，相比于 GSK3β，作用于PDK1的选择性高出100多倍。

靶点（IC50 & Targe）

CDK2/CyclinE,430nM

Chk1,510nM

c-Kit,320nM

PDK1,6nM

体外研究

BX795也抑制MARK1,MARK2,MARK4,NUAK1,VEGFR,MLK1,MLK2,和MLK3，IC50分别为55,53,19,5,157,50,46和42 nM。1 μM BX795不抑制如下酪氨酸蛋白激酶: 肝配蛋白受体A2和B3,Syk,Bruton's酪氨酸激酶,和FGFR1。然而，BX795抑制VEGFR，抑制效果比TBK1低。BX795抑制TBK1-催化的IRF3在Ser396位点磷酸化随着ATP浓度上升而下降,说明BX795是ATP竞争性抑制剂。BX795阻断TBK1和IKKε调节的IRF3激活，且抑制IFN-β的产量。聚(I:C)处理后，IRF3在核中积累，但是可被BX795抑制。 BX795抑制IRF3依赖的基因转录。BX795抑制IFN-β从巨噬细胞中分泌。BX795对LPS刺激的p70核糖体S6激酶1在Thr229位点磷酸化没有效果, Thr229位点是PDK1作用靶点。BX795不影响IKKα/β复合体或LPS,聚(I:C),IL-1α,或TNFα促进的NFκB依赖的基因转录的激活。BX795作用于IL-1α或TNFα刺激的MEFs，也阻断JNK1/2和p38α MAPK磷酸化。BX795抑制TBK1/IKKε不会导致JNK1/2和p38α MAPK的激活。[1]

激酶实验

蛋白激酶实验:

加入γ-32PATP(1000 cpm/pmol)开始实验，终浓度为0.1 mM。使用GST-IRF3作为底物, BX795抑制反应在30oC下进行30分钟，加入含40 mM EDTA,pH 为7.0的SDS终止反应，在100oC下加热5分钟，通过SDS-PAGE分离, 然后通过放射自显影技术测定磷酸化的蛋白。通过感光成像分析进行量化处理。IκBα底物肽实验在30oC下进行10分钟， 使一部分反应物放到一张2×2-cm2浸泡在75 mM磷酸中的磷酸纤维素P81纸上，终止反应。在磷酸中冲洗6次，在丙酮中冲洗1次，烘干纸，计数。

细胞实验

Cell lines: MDA-468, MDA-453, HCT-116, U87-MG

Concentrations: 0.001-1 μM

Incubation Time: 72小时

Method: 细胞系包括MDA-468,MDA-453,HCT-116,U87-MG等按每孔1.5-3×103个细胞接种在96孔板上，过夜。每孔加入溶于1% DMSO和生长培养基(DMSO最终浓度为0.1%)的10 μL BX795, 震荡处理。细胞温育72小时，加入10 μL代谢染料测定活力。在450 nm处测定WST-1信号。

(Only for Reference)

参考文献

[1] Feldman RI, et al. J Biol Chem. 2005, 280(20), 19867-19874.

[2] Clark K, et al. J Biol Chem. 2009, 284(21), 14136-14146.

[3] Dangelmaier C, et al. Thromb Haemost. 2013,111(4).

产品说明

应用

BX-795盐酸盐已被用于研究激酶抑制对人内源性逆转录病毒(HERV)转录激活的影响。

包装

5, 25 mg in glass bottle

生化/生理作用

BX-795会与3-磷酸肌醇依赖性激酶-1(PDK1)的底物ATP竞争它的ATP(三磷酸腺苷)结合口袋。体外检测表明BX-795可能会抑制Unc-51(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶)样自噬激活激酶(ULK1)。
BX-795最初被定性为3-磷酸肌醇依赖性激酶-1的一种有效抑制剂。利用BX-795进行的更多研究表明该分子也是IKKe和TBK1一种有效双重抑制剂，并已知其可通过干扰素调节因子3(IRF3)的磷酸化来调节干扰素的表达。

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产品性质

安全信息

产品说明

一般描述

A cell-permeable aminopyrimidine compound that acts as a potent, ATP-competitive and reversible multi-kinase inhibitor (IC₅₀ = 11 nM for PDK1 at ≤ 10 µM of ATP; IC₅₀ = 5 , 6, 19, 31, 41 and 111 nM for NUAK1, TBK1, MARK4, Aurora B, IKKε and PDK1 at 100 µM of ATP, respectively) and displays 50-fold greater selectivity over Cdk2/E, EGFR, GSK-3β, IR, c-Kit, PKA, PKC, TAK1 and VEGFR. Shown to block PDK1/Akt signaling, induce growth arrest and apoptosis in PC-3 and MDA-468 cells (IC₅₀ = 0.25 and 0.75 µM, respectively); further, inhibit phosphorylation (pSer³⁹⁶), nuclear translocation and transcriptional activity of IRF3 and reduce IFN-β production in stimulated macrophages.

包装

10 mg in Glass bottle
Packaged under inert gas

警告

Toxicity: Standard Handling (A)

重悬

Following reconstitution, aliquot and freeze (-20°C). Stock solutions are stable for up to 3 months at -20°C.

其他说明

Clark, K., et al. 2009. J. Biol. Chem.284, 14136.
Tamgumcy, T., et al. 2008. Exp. Cell Res.314, 2299.
Feldman, R.I., et al. 2005. J. Biol. Chem.280, 19867.

法律信息

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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