基本信息

技术规格

物性(参考值)

安全信息

图形或危害标志
信号词	警告
危险性说明	H315 : 造成皮肤刺激。 H319 : 造成严重眼刺激。
防范说明	P264 : 作业后彻底清洗皮肤。 P280 : 戴防护手套/戴防护眼罩/戴防护面具。 P302 + P352 : 如皮肤沾染：用水充分清洗。 P337 + P313 : 如仍觉眼刺激：求医/就诊。 P305 + P351 + P338 : 如进入眼睛：用水小心冲洗几分钟。如戴隐形眼镜并可方便地取出，取出隐形眼镜。继续冲洗。 P362+P364 : 脱掉沾污的衣服，清洗后方可重新使用。 P332 + P313 : 如发生皮肤刺激：求医/就诊。

相关法规

基本信息

产品描述

3-Methyladenine (3-MA)是一种选择性PI3K抑制剂，作用于Vps34和PI3Kγ，在 HeLa细胞中IC50分别为25 μM和60 μM；永久性抑制I型PI3K，但对III型PI3K的抑制是短暂的，也会阻断自噬体的形成。现配现用（加热助溶）。

靶点（IC50 & Targe）

PI3Kγ,60μM

Vps34,25μM

体外研究

3-MA对Vps34轻微的偏向性可能是由于Vps34中某个特异性的疏水环形结构可以环绕在3-MA的3-甲基基团外面造成的[1] 。据报道对于正常培养和饥饿处理的癌细胞3-MA都能引起细胞死亡。3-MA还可以不通过抑制自吞噬来抑制细胞迁移和入侵，这表明3-MA 除了抑制自吞噬之外还有其它生物功能。3-MA可以造成半胱天冬酶依赖的细胞死亡，这一功能与它对自吞噬的抑制无关。用5mM 3-MA处理葡萄糖饥饿Hela细胞可降低gfp-lc3阳性细胞比例至23%。3-MA处理细胞12到48小时内 LC3-I 的水平上升而LC3-II 水平下降。LC3-I转为为 LC3-II 的过程被3-MA抑制了。 2.5 mM 或5 mM 3-MA 处理HeLa 细胞一天并不影响细胞存活率, 而 10 mM 3-MA 处理一天会造成细胞存活率下降25.0% 。 2.5, 5 或 10 mM 3-MA 处理细胞两天分别使细胞存活率下降 11.5%, 38.0% 和79.4% 。3-MA 降低细胞存活率的作用具有时间和剂量依赖特性。3-MA 明显缩短nocodazole诱导的前中期阻断时间[2]。3-MA 通过抑制自吞噬来抑制SU11274诱导的细胞死亡[3]。 在野生型MEF细胞中延长 3-MA处理时间 (最多 9 小时) 明显造成 LC3 I 到 II 转换。延长 3-MA处理时间会明显增加GFP-LC3的聚集而wortmannin不具有此功能。3-MA介导的LC3 转换和游离 GFP 释放是ATG7依赖的。 3-MA处理会导致 p62 蛋白水平明显升高。即使在Atg5−/− 的MEF细胞中3-MA 也会使p62 水平升高，就像在DOX介导的ATG5缺失的细胞中一样 。3-MA以不同方式抑制 I 型和 III型 PI3K。与野生型细胞相比，在Tsc2−/−细胞中3-MA诱导的 LC3 I 到 LC3 II 转换过程大幅下降。3-MA会破坏mTOR复合物1的拮抗自吞噬功能[4]。

体内研究

3-Methyladenine (3-MA)可以通过对磷酸肌醇3磷酸激酶(PI3K) 的作用来阻断自吞噬, 而PI3K的活性对于自噬体形成早期膜池的成核和组装是必须的。与SAH 处理组相比3-MA并不会改变出血的程度。与SAH +对照成分组相比经过3-MA预处理后会明显加重神经病学症状。3-MA处理会减少自吞噬发生[5]。 相反地,在SAH + 3-MA组里 断裂的半胱天冬酶表达量明显上调，与此一致的是与SAH + 对照成分组相比，SAH + 3-MA组中右脑皮层里原位末端标记阳性细胞数量明显增多[5]。

激酶实验

Protein degradation assay:

HeLa cells are radiolabeled for 24 hours with 0.05 mCi/mL l-U- 14Cvaline. At the end of the labeling period, cells are rinsed three times with PBS. Cells are incubated for the designated times in either full medium or EBSS with or without the presence of 10 mM 3-Methyladenine.

细胞实验

Cell lines: HeLa 细胞系

Concentrations: 1-10 mM

Incubation Time: 3 分钟

Method: 用台盼蓝染色法分析细胞存活率（如HeLa细胞）。简言之, 经过3-MA处理后将贴壁的与漂浮的细胞都用PBS( pH 7.4)重悬，密度控制在每毫升1-2×106。加入等体积的0.4% 台盼蓝并彻底混匀。室温孵育3分钟后用血细胞计数器对细胞计数分析。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 体重 300-350 g 的成年雄性Sprague–Dawley 大鼠

Formulation: 生理盐水配制

Dosages: 400 nM

Administration: 脑室给药

(Only for Reference)

参考文献

[1] Miller S, et al. Autophagy. 2010, 6(6), 805-807.

[2] Hou H, et al. PLoS One. 2012, 7(4), e35665.

[3] Liu Y, et al. J Pharmacol Sci. 2012, 118(4), 423-432.

[4] Wu YT, et al. J Biol Chem. 2010, 285(14), 10850-10861.

[5] Jing CH, et al. Neuroscience. 2012.

安全信息

基本信息

Ref#
37979

MDL
10531

分子式
C6 H7 N5

分子量
149.15

形态
Solid

产品说明

应用

3-甲基腺嘌呤(3-MA)用于抑制和研究多种条件下自噬(溶酶体自我降解)和细胞凋亡的机制。3-MA可通过抑制III型磷脂酰肌醇3-激酶(PI-3K)阻断自噬体的形成来对自噬进行抑制。 3-MA通常以5 mM的浓度用作自噬抑制剂。
在癌症生成过程中核酸甲基化检测的标准品。
3-Methyladenine has been used as an autophagy inhibitor:

• to determine the expressions of autophagy-related genes (Beclin 1, light chain 3 (LC3) and p62) using the transfected human bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSCs)
• with cisplatin to study the inhibition of autophagy influenced cisplatin-induced apoptosis in A2780cp cells
• to study the interplay between colistin-induced autophagy and apoptosis

包装

100, 500 mg in poly bottle

生化/生理作用

3-Methyladenine (3-MA) is used to inhibit and study the mechanism of autophagy (lysosomal self-degradation) and apoptosis under various conditions. 3-MA inhibits autophagy by blocking autophagosome formation via the inhibition of type III phosphatidylinositol 3-kinases (PI-3K).

制备说明

该产品可溶于DMF(10 mg/mL；可能需要温和受热)。 受热情况下，其可以30 mg/ml的浓度溶于水、95％乙醇或1 N NaOH，但在冷却后会从溶液中析出。 可在DMSO中配制100 mM的3-MA溶液。

基本信息

产品性质

安全信息

产品说明

一般描述

一种广泛使用的细胞渗透性自噬隔离阻滞剂，可有效保护小脑颗粒细胞免于血清/钾缺乏后的凋亡。尽管也被成为III类PI3K抑制剂(在无细胞酶法测定中IC₅₀ = 4.5 mM)，3-MA展现出了与其他两种PI3K抑制剂显著不同的药理属性，即LY 294002(货号440202和440204)以及Wortmannin(货号681675)
一种广泛使用的细胞渗透性自噬隔离阻滞剂，可有效保护小脑颗粒细胞免于血清/钾缺乏后的凋亡。尽管也被成为III类PI3K抑制剂(在无细胞酶法测定中IC₅₀ = 4.5 mM)，3-MA展现出了与其他两种PI3K抑制剂显著不同的药理属性，即LY 294002(货号440202和440204)以及Wortmannin(货号681675)

包装

100 mg in Glass bottle
50 mg in Plastic ampoule
用惰性气体包装

警告

毒性：标准处理(A)

制备说明

在需要高工作浓度(例如10 mM)的应用中，使用预制的储备液可能会导致将比所需溶剂(例如DMSO)高的溶剂引入实验体系。在这种情况下，建议在将要使用时通过称量固体化合物并直接重新配制成用于实验系统的溶液(缓冲液、培养基等)。可能需要涡旋以实现在水中的完全溶解。

重悬

在重悬后分装并冻存于冰箱(-20°C。储备溶液在-20°C下可稳定保存至多3个月。

其他说明

Canu, N., et al. 2005.J. Neurochem.92, 1228.
Hirosako, K., et al. 2004.Biochem.Biophys.Res. Commun.316, 845.
Beugnet, A., et al. 2003.生物化学。J.372, 555.
Eskelinen, E.L., et al. 2002.Traffic3, 878.
Petiot, A., et al. 2000.J. Biol. Chem.275, 992.
Seglen, P.O. and Gordon, P.B., 1982.Proc.Natl.Acad.Sci. USA79, 1889.

法律信息

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

基本信息

产品性质

安全信息

基本信息

安全信息

图形或危害标志
危险性说明	H315: Causes skin irritation. H319: Causes serious eye irritation. H335: May cause respiratory irritation.
防范说明	P233: Keep container tightly closed. P260: Do not breathe . P261: Avoid breathing . P264: Wash hands thoroughly after handling. P271: Use only outdoors or in a well-ventilated area. P280: Wear . P302 + P352: IF ON SKIN: Wash with plenty of soap and water. P304: IF INHALED: Remove victim to fresh air and keep at rest in a position comfortable for breathing.. P304 + P340: IF INHALED: Remove victim to fresh air and keep at rest in a position comfortable for breathing. P305 + P351 + P338: IF IN EYES: Rinse cautiously with water for several minutes. Remove contact lenses, if present and easy to do. Continue rinsing. P312: Call a POISON CENTER or doctor/physician if you feel unwell. P321: Specific treatment (see relevant procedures. on this label). P332 + P313: If skin irritation occurs: Get medical advice/ attention. P337 + P313: If eye irritation persists: Get medical advice/attention. P340: Remove victim to fresh air and keep at rest in a position comfortable for breathing. P362: Take off contaminated clothing and wash before reuse. P403: Store in a well-ventilated place. P403 + P233: Store in a well-ventilated place. Keep container tightly closed. P405: Store locked up. P501: Dispose of contents/container to in accordance with local regulation .