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PCR/RT-PCR >> PCR试剂盒
腺病毒A型PCR试剂盒
腺病毒A型PCR试剂盒图片
包装: 50次
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半岛bd体育手机客户端 别名: Adenovirus(AV) PCR Kit
半岛bd体育手机客户端 介绍

半岛bd体育手机客户端 及特点

本公司开发腺病毒A型PCR试剂盒,它具有下列特点:

1、即开即用,用户只需要提供DNA模板。

2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增腺病毒A型,与其他病原没有交叉反应。

3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。

规格及成分

成份

编号

十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL(红盖)

超纯水

100935

1 mL(亮黄盖)

腺病毒A型PCR引物混合液

13-35710

100μL(白盖)

腺病毒A型PCR阳性对照(1×108拷贝/μL)

60908-23300pc

50μL(黄盖)

使用手册

13-35710sc

1份

运输及保存

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂

样品DNA。

使用方法

一、样品DNA的制备

1、用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式细菌DNAout。

2、如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL腺病毒A型PCR阳性对照的1000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。

二、设置PCR反应(40μL体系)

3、对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:

成分

N+2

样品管

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

腺病毒A型PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2个样品DNA模板

各18μL

-

-

PCR阴性对照(水)

-

18μL

-

PCR阳性对照(腺病毒A型PCR阳性对照的1000倍稀释液)

-

-

18μL

4、按下表设置PCR反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应(35个循环)

95℃

15sec

57℃

15sec

72℃

40sec

最后延伸

72℃

10 min

三、电泳检测

5、取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。PCR产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。

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