小鼠二步法免疫组化试剂盒
半岛bd体育手机客户端 名称
免疫组化试剂盒
二步法
半岛bd体育手机客户端 介绍
小鼠二步法免疫组化试剂盒 一、试剂盒成份:
二、染色步骤: 1、 石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS(0.01M,pH7.4)冲洗三次,每次3分钟(3x3min)。 2、 根据每种抗体的要求,对组织抗原进行相应的修复。 3、 每张切片加1滴或50ul的3%H202,室温孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3x3min。 4、除去PBS液,每张切片加1滴或50ul封闭液,室温孵育10-30分钟。 5、除去封闭液,每张切片加1滴或50ul第×抗体(用5%牛血清白蛋白或PBS稀释),室温孵育60分钟或4℃ 过夜,建议参见每种抗体的说明书。 6、PBS冲洗3x5min。除去PBS液,每张切片加1滴或50ul聚合物增强剂,室温孵育20分钟,PBS冲洗3x5min。 7、除去PBS液,每张切片加1滴或50ul酶标抗体,室温孵育20分钟,PBS冲洗3x5min。 8、除去PBS液,每张切片加1滴或50ul新鲜配制的DAB或AEC溶液,显微镜观察3~5分钟( DAB )或10分钟( AEC ),根据显色情况适时终止显色反应。 9、自来水冲洗,苏木素复染,若有必要,可用0.1%HCl分化,自来水冲洗,PBS返蓝。 10、如果用DAB显色,则切片经梯度酒精脱水干燥,(二甲苯透明),中性树胶封片,如果用AEC显色,则切片不能酒精脱水,直接用水性封片剂。
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